RBOHD(呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D)是一種鈣依賴性NADPH氧化酶，可產(chǎn)生超氧化物。參與與病原體不相容相互作用期間活性氧物種(ROS)的產(chǎn)生以及UV-B和脫落酸ROS依賴性信號(hào)傳導(dǎo)。
 

　　艾美捷 RBOHD |呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D應(yīng)用案例：
 

　　從Col-0(野生型)和rbohd空突變體(Nühse et al.，2007)的10或12株7日齡擬南芥幼苗中分離出總蛋白。16µl總蛋白在65°C下變性5分鐘，在8%SDS-PAGE上分離。并在55V電壓下使用槽式傳輸系統(tǒng)傳輸70分鐘至硝化纖維素膜。用1xPBS+0.1%吐溫20+5%牛奶(PBS-T)或TBS+0.1%吐溫20(TBS-T)+5%牛奶在室溫(RT)下攪拌2小時(shí)阻斷印跡。一級(jí)抗體按指示分別稀釋至1:2500和1:5000，并在4℃下在1xPBS-T pr TBS-T+5%牛奶中攪拌培養(yǎng)。傾析一級(jí)抗體溶液，在RT條件下攪拌，在1xPBS-T或TBS-T中洗滌印跡3次(每次7分鐘)。根據(jù)制造商的建議，將二級(jí)抗體山羊抗兔HRP結(jié)合物(AS09 602，Agrisera)稀釋至1:20000，并使用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑對(duì)印跡進(jìn)行培養(yǎng)。X射線膠片的曝光時(shí)間為2分鐘。作為同一膜的對(duì)照部分，用抗CNX1/2抗體(AS12 2365，Agrisera)孵育。
 

　　RBOHD丨呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D相關(guān)研究工具介紹：
 

　　1、針對(duì)參與氧化應(yīng)激的蛋白質(zhì)的抗體的收集
 

　　2、植物蛋白提取緩沖液
 

　　3、二級(jí)抗體
 

　　參考資料：
 

　　Nühse等人。質(zhì)膜蛋白的定量磷酸化蛋白質(zhì)組分析揭示了植物天然免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)機(jī)制。植物J。2007年9月；51(5): 931–940.
 

　　Nga Nguyen、Kelly Mason和Antje Heese(密蘇里大學(xué)-哥倫比亞大學(xué)，密蘇里州，美國(guó))提供
 

　　Agrisera公司提供的植物領(lǐng)域的抗體涵蓋擬南芥、萊茵衣藻、藍(lán)藻、松柏類、硅藻、大豆、大麥、蒺藜苜蓿、煙草、稻、菜豆、小立碗蘚、楊樹(shù)、豌豆、番茄、馬鈴薯、菠菜、小麥、玉米、葡萄等多個(gè)物種。艾美捷科技是Agrisera的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的RBOHD丨呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D。