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上海科順生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： elisa,生物試劑,標準品,抗體 |
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主營產(chǎn)品： elisa,生物試劑,標準品,抗體 |
2020-3-4 閱讀(231)
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒
英文簡稱：Human Claudin 1 (ZO1) ELISA Kit
產(chǎn)品貨號：KS14833
品牌名稱：科順生物
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標記的檢測抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1個 1個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
酶標試劑 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
20×濃縮洗滌液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
注：標準品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。
4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
9.測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，zuei好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，
在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
人緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒相關優(yōu)質產(chǎn)品:
KS13570 雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
KS13571 雞類胰島生長因子(IGF-I)ELISA試劑盒
KS13572 雞四dian甲腺原氨酸(T4)ELISA試劑盒
KS13573 雞三dian甲腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒
KS13574 人血管緊張素Ⅰ轉化酶2(ACE-2)ELISA試劑盒
KS13575 人血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒
KS13576 滴滴涕(DDT)ELISA試劑盒
KS13577 氧hua樂guoELISA試劑盒
KS13578 人骨成型蛋白5(BMP5)ELISA試劑盒
KS13579 人骨形成蛋白8A(BMP8A)ELISA試劑盒
KS13580 人卵泡刺激素受體(FSHR)ELISA試劑盒
KS18045 豬蛋白C(PROC)ELISA試劑盒
KS16608 豬的抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒
KS10693 豬低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒
KS17870 豬低氧誘導因子1α(HIF1α)ELISA試劑盒
KS13585 牛補體1q(C1q)ELISA試劑盒
KS13586 小鼠乳酸(Lactate)ELISA試劑盒
KS13587 牛觸珠蛋白(HP)ELISA試劑盒
KS13588 人組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)ELISA試劑盒
KS13589 植物幾丁質酶(chitinase)ELISA試劑盒
KS13590 植物原卟啉原氧化酶(ppo)ELISA試劑盒
KS13591 大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒
KS13592 植物乙酰乳酸合成酶(ALS)ELISA試劑盒
KS13593 大鼠CD68分子(CD68)ELISA試劑盒
KS13594 人還原型*(GSH)ELISA試劑盒
KS13595 人褪黑激素(Melatonin)ELISA試劑盒
KS13596 人促腎上腺皮質素(ACTH)ELISA試劑盒
KS13597 人睪丸酮(Testosterone)ELISA試劑盒
KS13598 人趨化因子IP-10(interferon-inducible protein-10)ELISA試劑盒
KS13599 人多巴胺DopamineELISA試劑盒
KS13600 人γ-胺基丁酸GABAELISA試劑盒
KS13601 人低氧誘導因子1a(HIF-1a)ELISA試劑盒
KS13602 人乙酰*羧化酶(ACCase)ELISA試劑盒
KS13603 猴孕酮(P)ELISA試劑盒
KS13604 猴雌二醇(E2)ELISA試劑盒
KS13605 大鼠*(Dex)ELISA試劑盒
