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主營產(chǎn)品: elisa,生物試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體 |
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主營產(chǎn)品: elisa,生物試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體 |
2019-9-10 閱讀(62)
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒
英文簡稱:Dog complement component (C) ELISA kit
產(chǎn)品貨號(hào):KS16902
品牌名稱:科順生物
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純化的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1個(gè) 1個(gè)
酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
酶標(biāo)試劑 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
20×濃縮洗滌液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
9.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
犬補(bǔ)體成分(C)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
KS13497 人間羥腎上腺素(MN)ELISA試劑盒
KS13498 羊傳染性胸膜肺炎(pleuropneumonia)ELISA試劑盒
KS12425 豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒
KS18081 豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O(LLO)ELISA試劑盒
KS18046 豬膽囊收縮素(CCK)ELISA試劑盒
KS13502 大鼠四dian甲腺原氨酸(T4)ELISA試劑盒
KS13503 大鼠dian甲腺原氨酸脫dian酶Ⅰ(DIO1)ELISA試劑盒
KS13504 大鼠反三dian甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒
KS13505 大鼠dian甲腺原氨酸脫dian酶Ⅱ(DIO2)ELISA試劑盒
KS13506 大鼠dian甲腺原氨酸脫dian酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒
KS13507 小鼠還原型*(GSH)ELISA試劑盒
KS13508 微生物還原型*(GSH) ELISA試劑盒
KS13509 大鼠I型膠原C端肽(CTX-I)ELISA試劑盒
KS13510 大鼠I型前膠原氨基端原肽(PINP)ELISA試劑盒
KS13511 兔分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒
KS13512 人水痘帶狀皰疹病毒抗原(VZV)ELISA試劑盒
KS13513 大鼠單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒
KS13514 人胰島素(Insulin)ELISA試劑盒
KS13515 大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2(UGT2)ELISA試劑盒
KS13516 人抗β3腎上腺素能受體自身抗體(β3-AR)ELISA試劑盒
KS13517 人腫瘤壞死因子γ(TNFγ)ELISA試劑盒
KS13518 人6-羥基硫酸褪黑素(6-SMT)ELISA試劑盒
KS13519 人血管加壓素(VP)ELISA試劑盒
KS13520 大鼠血小板衍生生長因子β(PDGF-β)ELISA試劑盒
KS13521 大鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-1a)ELISA試劑盒
KS13522 大鼠孕烷X受體(PXR)ELISA試劑盒
KS13523 魚?;?氧化酶(ACO)ELISA試劑盒
KS13524 魚葡萄糖6磷酸脫氫酶(G-6-PD) ELISA試劑盒
KS13525 魚蘋果酸脫氫酶(MDH)ELISA試劑盒
KS13526 魚異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒
KS13527 大鼠鈣離子(Ca2+)ELISA試劑盒
KS13528 大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒
KS13529 犬胃泌素(GT)ELISA試劑盒
KS13530 人抗肌集鈣蛋白抗體(IgG)ELISA試劑盒
KS13531 人抗UACA抗體(IgG)ELISA試劑盒
KS13532 大鼠*硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒