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小鼠胚胎干細(xì)胞；LT04實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間：2017-08-02 15:24:56瀏覽次數(shù)：251次

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小鼠胚胎干細(xì)胞；LT04實(shí)驗(yàn)方法售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱 小鼠胚胎干細(xì)胞；LT04實(shí)驗(yàn)方法

形態(tài)特性上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況 C5

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 陰性

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限未定

細(xì)胞名稱	小鼠胚胎干細(xì)胞；LT04實(shí)驗(yàn)方法
生長(zhǎng)特性	懸浮生長(zhǎng)
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
肝再生增強(qiáng)因子抗體 ALR
APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體 Amyloid Precursor Protein
甲胎蛋白單克隆抗體（包被） AFP(A2)
甲胎蛋白單克隆抗體(檢測(cè)) AFP(A4)
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 ARFIP1
芳香烴受體抗體 AHR
吸引素抗體 ATRN
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體 ABCA1
蛋白激酶B2 AKT2
血管生成素2抗體 Angiopoietin 2
芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體 Aromatase
腺苷A2A受體抗體 Adenosine Receptor A2a
蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 AKAP95
頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 ASBT
去整合素樣金屬蛋白酶8抗體 ADAM8
芳香乙酰胺脫乙?；笜拥鞍?抗體 AADACL3
ACN9蛋白抗體 ACN9
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端） ADAR1 (N-terminus)
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 AMPK alpha 2
腺苷酸激酶抗體 ADK
α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1 A2ML1
細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體 3-Apr
肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體 Actin
ATP結(jié)合蛋白家族7抗體 ABCB7
ASCL2蛋白抗體 ASCL2
磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 phospho-Ataxin 1(Ser775)
磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 phospho-ATF1 (Ser63)
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Ser480)
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)
胞抑制性受體2DL3抗體IgG 體液過(guò)氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL4抗體IgG 植物過(guò)氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgG 細(xì)胞二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgG 組織二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD158i/KIR2DS4/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DS4抗體IgG 血液二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD147/EMMPRIN/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體IgG 體液二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD151/MER2/PETA-3/FITC 熒光素標(biāo)記CD151抗體IgG 細(xì)胞二胺氧化酶（DAO）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD155/PVR/FITC 熒光素標(biāo)記CD155抗體IgG 組織二胺氧化酶（DAO）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD160/By55/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞受體BY55抗體IgG 血液二胺氧化酶（DAO）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD161/NK1.1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgG 體液二胺氧化酶（DAO）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD163/M130/FITC 熒光素標(biāo)記CD163抗體IgG 細(xì)胞多胺氧化酶（PAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD166/ALCAM/FITC 熒光素標(biāo)記活化白細(xì)胞粘附分子抗體IgG 組織多胺氧化酶（PAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-CD167a/DDR1/FITC 熒光素標(biāo)記CD167a抗體IgG 血液多胺氧化酶（PAO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml