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F81（貓腎細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間：2017-08-01 16:15:32瀏覽次數(shù)：542次

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F81（貓腎細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱:F81（貓腎細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法

細(xì)胞形態(tài)

背景描述

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

RPMI-1640(貨號(hào):PM150110)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞名稱	F81（貓腎細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)方法
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

HA tag標(biāo)簽抗體 HA tag
荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 HSL/LIPE
血紅蛋白α1/α-Globin抗體 HBA1
Fas相互作用蛋白激酶2抗體 HIPK2
Fas相互作用蛋白激酶3抗體 HIPK3
人類皰疹病毒8抗體 HHV8 ORF50
磷酸化熱休克蛋白27抗體 Phospho-HSP27 (Ser82)
人類皰疹病毒8抗體 HHV8/ORF K2
人類皰疹病毒8抗體 HHV8 ORF50
雌激素下調(diào)基因1蛋白抗體 HEXIM1
轉(zhuǎn)錄因子HEY2蛋白抗體 HEY2
肺癌相關(guān)蛋白Y抗體 LAGY
心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白1抗體 HAND1
己糖激酶2抗體 Hexokinase II
熱休克蛋白90α/HSP90 α抗體 HSP90 alpha
血紅蛋白β抗體 Hemoglobin Beta
透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白2抗體 HABP2
透明質(zhì)酸及粘蛋白2抗體 HAPLN2
透明質(zhì)酸合成酶3抗體 HAS3
熱休克蛋白56抗體 FKBP52
熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體 HSPABP/HIP/HSC70 Interacting Protein HIP
熱休克蛋白相關(guān)蛋白4抗體 DNAJA1
透明質(zhì)酸合成酶2抗體 HAS2
同源盒基因HOXA3蛋白抗體 HOXA3
同源盒基因HOXA4蛋白抗體 HOXA4
同源盒基因HOXA6蛋白抗體 HOXA6
同源盒基因HOXA7蛋白抗體 HOXA7
羥基類固醇(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體 HSD17B4
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體 HBZ
血紅素結(jié)合蛋白1抗體 HEBP1
血紅蛋白α抗體 Hemoglobin alpha
結(jié)合球蛋白β抗體 Haptoglobulin beta
海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 HIAT1
組蛋白H2AZ抗體 Histone H2A.Z
熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體 HSF2 binding protein

抗體（C端）IgG 變?nèi)~木*培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-Synaptopodin/FITC 熒光素標(biāo)記突觸極蛋白synaptopodin抗體IgG 風(fēng)信子*培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-Synapsin II /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)突觸素2抗體IgG 離體培再生（rhizogenesis）培養(yǎng)基 0.2ml
Ai- Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-α抗體IgG 離體培養(yǎng)愈傷組織再生（callogenesis）培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-phospho-Synapsin I (Ser9) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體IgG 離體培養(yǎng)枝芽發(fā)生（caulogenesis）培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體IgG 菊花組織凍存試劑盒 0.2ml
Ai- Gamma-Synuclein/SNCG /FITC 熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-γ抗體IgG 氣生蘭（epiphytic）播種增殖培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-Syaxin 1/Syn1A /FITC 熒光素標(biāo)記突觸融合蛋白1抗體IgG 氣生蘭（epiphytic）移植維護(hù)培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標(biāo)記核突觸蛋白/突觸素-1抗體IgG 氣生蘭（epiphytic）克隆增殖培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-SYPH1/FITC 熒光素標(biāo)記synphilin-1抗體IgG 地生蘭（terrestrial）播種培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-SYVN1/FITC 熒光素標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgG 地生蘭（terrestrial）移植維護(hù)培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-TNF- Alpha /Biotin *標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體地生蘭（terrestrial）增殖培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-T3/FITC 熒光素標(biāo)記三碘甲狀腺素T3抗體IgG 蘭花Knudson培養(yǎng)基 0.2ml
Ai-TACR3/NK-3 receptor /FITC 熒光素標(biāo)記速激肽受體3抗體IgG 蘭花Vacin & We培養(yǎng)基 0.2ml