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3T3-Swiss albino（小鼠胚胎成纖維細胞）操作步驟

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更新時間：2017-07-31 15:16:23瀏覽次數(shù)：226次

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上海邦景實業(yè)有限公司

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聯(lián)系人：陳小姐（銷售）

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產(chǎn)品簡介

3T3-Swiss albino（小鼠胚胎成纖維細胞）操作步驟售后：收到細胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱:3T3-Swiss albino（小鼠胚胎成纖維細胞）操作步驟

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

背景描述

3T3-Swiss albino細胞是于1962年從分解的瑞士小鼠胚胎中建立的，3T3-Swiss albino細胞在生長過程中會發(fā)生接觸抑制，一個長滿的單層產(chǎn)量是40000cells/cm^2，其飽和密度可以達到約50000cells/cm^2。測試表明，3T3-Swiss albino細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性；3T3-Swiss albino細胞應在塑料瓶中生長，在玻璃器皿表面上可能長不好。

生長培養(yǎng)基

DMEM高糖(貨號:PM150210)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細胞名稱	3T3-Swiss albino（小鼠胚胎成纖維細胞）操作步驟
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價格	來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內(nèi)膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
垂體瘤細胞凋亡抗體 RHBDD3
環(huán)指蛋白122抗體 RNF122
RAS相關GTP結(jié)合蛋白C抗體 RRAGC
環(huán)指蛋白36抗體 RNF36
受體相互作用蛋白激酶1抗體 RIP1
環(huán)指蛋白7抗體 RNF7
核糖體蛋白S3抗體 RPS3
原癌基因R-Ras抗體 RRAS
磷酸化指狀蛋白RET抗體 Phospho-Ret (Tyr905)
染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體 RCC2
Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 RACGAP1
*結(jié)合蛋白抗體 Retinol binding protein
補體應答基因32抗體 RGC32
細胞堿性蛋白1樣蛋白抗體 RSBN1L
E3泛素蛋白連接酶144A抗體 RNF144
轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4抗體 RFX4
Rab溶酶體相互作用蛋白樣2抗體 RILPL2
12號染色體開放閱讀框52抗體 RITA
梅克爾憩室綜合征相關蛋白5抗體 RPGRIP1L
β1,3-N-乙酰糖基轉(zhuǎn)移酶抗體 Radical Fringe
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位1抗體 RAB3GAP1
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位2抗體 RAB3GAP2
維甲酸誘導蛋白1抗體 RAI1
環(huán)指蛋白13抗體 RNF13
環(huán)指蛋白15抗體 RNF15
金屬蛋白酶抑制因子RECK抗體 RECK
*受體應答蛋白3抗體 Rarres3
*受體應答蛋白1抗體 RARRES1
環(huán)指蛋白128抗體 RNF128
RAM-11抗體 Rab27a
抑癌基因Rbms3抗體 Rbms3
抵抗素樣分子α抗體 RELM alpha
細胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體 Reprimo
酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體 RPLP0
RAN結(jié)合蛋白3抗體 RanBP3
兒素受體相關蛋白(抗原)   0.5mg
TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain) 有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關蛋白抗原   0.5mg
TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關因子1抗原   0.5mg
TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 腫瘤壞死因子受體相關因子2抗原   0.5ml
TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein) 腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗原   0.5mg
TRAF6 (TNF receptor-associated factor 6) 腫瘤壞死因子受體相關因子6抗原   0.5mg
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗原   0.5mg
TRBF1 (omeric repeat binding factor 1) 端粒體復制結(jié)合因子1抗原   0.5mg
TRIM32(tripartite motif protein 32) TRIM32抗原   0.5mg
Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原   0.5mg
TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精細胞凋亡相關基因4抗原   0.5mg
TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性腫瘤特異性生長因子抗原   0.5mg
CIDEB peptide CIDEB抗原   0.5mg
Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原   0.5mg
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺素受體抗原   0.5mg
MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關蛋白輕鏈3抗原   0.5mg
TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌腫瘤阻抑基因1抗原   0.5mg
TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原   0.5mg
Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原   0.5mg
TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原   0.5mg