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RBL-2H3（大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞）操作步驟

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更新時(shí)間：2017-07-31 14:30:33瀏覽次數(shù)：275次

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RBL-2H3（大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞）操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱:RBL-2H3（大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞）操作步驟

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

背景描述

RBL-2H3細(xì)胞是1978年國(guó)立牙科研究所的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細(xì)胞中分離和克隆出來(lái)的嗜堿性白血病細(xì)胞株。RBL-2H3細(xì)胞具有高親和力的IgE受體，通過(guò)集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。RBL-2H3細(xì)胞廣泛地用于研究肥大細(xì)胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細(xì)胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細(xì)胞分泌的不同方面，包括細(xì)胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號(hào)的FBS都支持細(xì)胞的生長(zhǎng)，但在某些批號(hào)中FcERI集聚后脫?；酶谩Ａ硪恢甏笫笫葔A性細(xì)胞株(RBL)不會(huì)脫?；?。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

MEM(貨號(hào):PM150410)＋15% heat-inactivated FBS＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞名稱	RBL-2H3（大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞）操作步驟
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
(Thr184 + Thr187)
磷酸化NF-κB活化激酶抗體 Phospho-TBK1 (Ser172)
馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 Tuberin
磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 Phospho-Tuberin (Ser1387)
磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 Phospho-Tuberin(Ser939)
磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 Phospho-Tuberin(Tyr1571)
磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 Phospho-TSC2 (Thr1462)
磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 Phospho-Tuberin (Thr927)
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 phospho-Tau protein(Ser396)
非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體 TNK1
磷酸化非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體 Phospho-TNK1 (Tyr277)
磷酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 TORC1
磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 Phospho-Torc1 (Ser151)
CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 TORC2
腫瘤壞死因子β抗體（TNFβ） TNF beta
轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 TCF7L2
血栓素B2(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)抗體 TBX2
特異*/*激酶6抗體 TSSK6
tRNA剪接內(nèi)切酶2抗體 TSEN2
腫瘤蛋白D53抗體 D53
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 TRAF7
酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶2抗體 TPST2
腫瘤壞死因子受體超家族成員27抗體 EDA2R
四分子交聯(lián)體14抗體（四旋蛋白） TSPAN14
甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1相關(guān)蛋白26抗體 TAP26/CCDC59
線粒體外膜受體Tom20抗體 TOM20
48T
MIP-5(Human macrophage inflammatory protein 5) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5   48T
sE-selectin(Human soluble E-selectin) ELISA Kit 人可溶性E選擇素   48T
sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1   48T
ICAM-2/CD102(Human intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit 人細(xì)胞間粘附分子2   48T
ICAM-3/CD50(Human intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit 人細(xì)胞間粘附分子3   48T
CTGF(Human connective tissue growth factor) ELISA Kit 人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子   48T
IL-18(Human Interleukin 18) ELISA KIT 人白介素18   48T
MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子   48T
BAFF-R(Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor) ELISA Kit 人B細(xì)胞活化因子受體   48T
VEGFR-3/Flt-4(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2) ELISA kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3   48T
VEGFR-1/Flt1(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1   48T
VEGF-D(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D) ELISA KIT 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D   48T
VEGF-C(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C) ELISA KIT 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C   48T
VEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B) ELISA KIT 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B   48T