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小鼠破骨細(xì)胞操作步驟

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更新時間：2017-07-26 16:06:02瀏覽次數(shù)：332次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  ATCC細(xì)胞

動物細(xì)胞

人源免疫細(xì)胞及干細(xì)胞

細(xì)胞系

原代細(xì)胞

轉(zhuǎn)化細(xì)胞

人正常組織來源細(xì)胞

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上海邦景實業(yè)有限公司

經(jīng)營模式：經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品：9896條

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聯(lián)系人：陳小姐（銷售）

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產(chǎn)品簡介

小鼠破骨細(xì)胞操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠破骨細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：骨髓

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓；破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，屬于不增殖細(xì)胞群，不能增殖和傳代，只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。

本公司的小鼠破骨細(xì)胞采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)TRAP染色鑒定，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

MEM-α、FBS、破骨細(xì)胞誘導(dǎo)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞名稱	小鼠破骨細(xì)胞操作步驟
規(guī)格	5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
價格	來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13
小鼠白血病抑制因子受體
小鼠穿孔素
人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7
小鼠突觸素
人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M
小鼠免疫球蛋白IgG
小鼠免疫球蛋白IgM
小鼠免疫球蛋白IgA
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A
人組織蛋白酶抗體
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶
人抗殺菌通透性增高蛋白抗體
大鼠5核苷酸酶
大鼠骨保護(hù)素
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG
人抗蛋白酶3抗體IgG
大鼠B因子
大鼠抑瘤素M
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體
大鼠胎盤生長因子
人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體
大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體
大鼠L苯*解氨酶
人抗核小體抗體IgG
大鼠可溶性CD30配體
人抗硬皮病抗體70
大鼠可溶性CD40配體
人抗SS-B/La抗體
大鼠干細(xì)胞因子受體
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β
人落葉型天皰瘡抗體
氧核糖核酸酶抗體IgG   0.2ml
Anti-CA I/FITC 熒光素標(biāo)記碳酸酐酶1抗體IgG   0.2ml
Anti-CA II /FITC 熒光素標(biāo)記碳酸酐酶2抗體IgG   0.2ml
Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白磷酸酯酶-2B催化亞單位抗體IgG   0.2ml
Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標(biāo)記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-p-Caldesmon/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化鈣介質(zhì)素抗體IgG   0.2ml
Anti-Smoothened/SMOH /FITC 熒光素標(biāo)記跨膜蛋白Smoothened抗體IgG   0.2ml
Anti-Calpain 1/FITC 熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶抗體IgG   0.2ml
Anti-Calpain 2/FITC 熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶2抗體IgG   0.2ml
Anti-Calponin 1/FITC 熒光素標(biāo)記鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體IgG   0.2ml
Anti-Camk1g/FITC 熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 IgG   0.2ml
Anti-CaMK2a/FITC 熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體IgG   0.2ml
Anti-CaMK2b/FITC 熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗體IgG   0.2ml
Anti-CANX/FITC 熒光素標(biāo)記抗鈣連蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-ISR- Alpha/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記(RBITC)胰島素受體-α抗體IgG(標(biāo)記抗體)   0.2ml
Anti-CAP2/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體IgG   0.2ml
Anti-Cap43/NDRG1 /FITC 熒光素標(biāo)記分化相關(guān)基因Cap43抗體IgG   0.2ml
Anti-CAS/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞凋亡敏感性基因抗體IgG   0.2ml
Anti-Casein/FITC 熒光素標(biāo)記抗牛酪蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-Caspase-1/FITC 熒光素標(biāo)記天冬氨酸-*