1.產品名稱：大鼠角膜上皮細胞實驗方法
2.組織來源：眼角膜組織
3.產品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
大鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，*部zui薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。其主要功能如下：①角膜是*的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞；②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng)；③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段，常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。
本公司的大鼠角膜上皮細胞采用*-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內有問題公司負責重發(fā)，超過五天時限至一個月內重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
(CKB) 96T Y17830 Homo sapiens (Human)
磷脂酶D(PLD)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Phospholipase D (PLD) 96T Y17831 Homo sapiens (Human)
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17832 Bos taurus; Bovine (Cattle)
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17833 Homo sapiens (Human)
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17834 Mus musculus (Mouse)
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17835 Sus scrofa; Porcine (Pig)
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17836 Rattus norvegicus (Rat)
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Y17837 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
賴氨酰氧化酶(LOX)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 96T Y17838 Rattus norvegicus (Rat)
組織轉*酶(TGM2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transglutaminase 2, Tissue (TGM2) 96T Y17839 Homo sapiens (Human)
RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for RAB5A, Member RAS Oncogene Family (RAB5A) 96T Y17840 Homo sapiens (Human)
鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免
0.2ml
Anti-TNF- Beta/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子-β抗體IgG 0.2ml
Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-TNFAIP3 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠腫瘤壞死因子α誘導蛋白3抗體IgG 0.2ml
Anti-TNFSF14/LIGHT/CD258/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體IgG 0.2ml
Anti-TNFSF4/CD252/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體IgG 0.2ml
Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標記腫瘤壞死因子抗體IgG 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體IgG 0.2ml
Anti-CD34/Biotin *標記CD34抗體IgG 0.2ml
Anti-TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光素標記DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體IgG 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標記腫瘤壞死因子抗體 0.2ml
Anti-TP53/FITC 熒光素標記抗腫瘤P53抗體IgG 0.2ml
Anti-t-PA/FITC 熒光素標記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgG 0.2ml
Anti-TPH /FITC 熒光素標記*羥化酶抗體IgG 0.2ml
Anti-TPO/FITC 熒光素標記兔抗甲狀腺過氧化物酶抗體IgG 0.2ml
Anti-TRA16/FITC 熒光素標記激素受體相關蛋白16抗體IgG 0.2ml
Anti-TRA16 /FITC 熒光素標記激素受體相關蛋白/孤兒素受體相關蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-TRADD/FITC 熒光素標記有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-TP I /FITC 熒光素標記拓普西異構酶Ⅰ抗體IgG 0.2ml
Anti-TRAF1/Biotin *化腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體 0.2ml
