【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：眼球組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的zui前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開口，稱為瞳孔，猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時(shí)，虹膜會(huì)收蹜，只使一小束光線穿透瞳孔，進(jìn)入眼睛；當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中，虹膜就會(huì)往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線進(jìn)入眼睛，多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞(IPE)是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學(xué)功能，因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。

本公司的大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞采用*-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

M199、FBS、上皮細(xì)胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。

血管緊張素原(AGT)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Angiotensinogen (AGT) 96T Y17854 Mus musculus (Mouse)
神經(jīng)型一氧化氮合酶()檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal () 96T Y17855 Homo sapiens (Human)
淀粉樣前體蛋白(APP)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP) 96T Y17856 Homo sapiens (Human)
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7 (IGFBP7) 96T Y17857 Homo sapiens (Human)
含CUB域蛋白1(CDCP1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for CUB Domain Containing Protein 1 (CDCP1) 96T Y17858 Homo sapiens (Human)
多功能蛋白聚糖(VS)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Versican (VS) 96T Y17859 Homo sapiens (Human)
聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Aggrecan (AGC) 96T Y17860 Homo sapiens (Human)
觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Haptoglobin Related Protein (HPR) 96T Y17861 Homo sapiens (Human)
白介素20(IL20)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 20 (IL20) 96T Y17862 Rattus norvegicus (Rat)
脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN) 96T Y17863 Chicken (Gallus)
酸性葡萄糖苷酶β(GβA)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Glucosidase Beta, Acid (GbA) 96T Y17864 Homo sapiens (Human)
  0.2ml
Anti-TrK A/FITC  熒光素標(biāo)記*激酶A抗體IgG   0.2ml
Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC  熒光素標(biāo)記*激酶A.B.C抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*激酶A抗體IgG   0.2ml
Anti-Trk B/FITC  熒光素標(biāo)記*激酶B抗體IgG   0.2ml
Anti-Trk B/FITC  熒光素標(biāo)記*激酶B抗體IgG   0.2ml
Anti-Trk C/FITC  熒光素標(biāo)記*激酶C抗體IgG   0.2ml
Anti-Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC  熒光素標(biāo)記原肌球蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-TRPM2 /FITC  熒光素標(biāo)記瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白抗體（M亞家族）IgG   0.2ml
Anti-TRP1/gp75 /FITC  熒光素標(biāo)記*酶相關(guān)蛋白1抗體IgG   0.2ml
Anti-TRP2/FITC  熒光素標(biāo)記*酶相關(guān)蛋白2抗體IgG   0.2ml
Anti-Trx/FITC  熒光素標(biāo)記硫氧還蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-TSARG3/FITC  熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體IgG   0.2ml
Anti-TSARG4/FITC  熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體IgG   0.2ml
Anti-TSARG6/FITC  熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體IgG   0.2ml
Anti-TSARG7/FITC  熒光素標(biāo)記發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG   0.2ml
Anti-TSFP1/SP1 /FITC  熒光素標(biāo)記SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗體IgG   0.2ml
Anti-tsg101/FITC  熒光素標(biāo)記tsg101抗體IgG   0.2ml
Anti-TSH/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體IgG   0.2ml
Anti-TSHR/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG   0.2ml
Anti-TSHR(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體（C端）IgG   0.2ml
Anti-TSHR /FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG   0.2ml
Anti-TSHR(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體（N端）IgG   0.2ml
Anti-TSH/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素抗體IgG   0.2ml
Anti-TSH/Biotin  *化促甲狀腺素抗體IgG