1.產(chǎn)品名稱：大鼠小腦顆粒細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法

2.組織來源：小腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠小腦顆粒細(xì)胞分離自小腦皮層組織；神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)zui基本的結(jié)構(gòu)與功能單位，小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元，直徑約10μm，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富，近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似，而且數(shù)量多、便于取材，因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元，在哺乳動(dòng)物的小腦內(nèi)數(shù)量zui為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相，形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路，在小腦的神經(jīng)活動(dòng)中起著非常重要的作用。在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病中，病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元，導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損，從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào)。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng)、病理發(fā)生的機(jī)理特別是分子機(jī)理，有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo)，這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè)，小腦顆粒細(xì)胞通過g-氨基丁酸接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。

本公司的大鼠小腦顆粒細(xì)胞采用*消化法結(jié)合神經(jīng)元培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin/MAP-2免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

Neurobasal-A、B-27、Penicillin、Streptomycin等

優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3(WNT3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3) 96T Y17919 Homo sapiens (Human)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員2(WNT2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2) 96T Y17920 Homo sapiens (Human)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員1(WNT1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 1 (WNT1) 96T Y17921 Homo sapiens (Human)
WNT抑制因子1(WIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for WNT Inhibitory Factor 1 (WIF1) 96T Y17922 Homo sapiens (Human)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B (WNT5B) 96T Y17923 Homo sapiens (Human)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 96T Y17924 Homo sapiens (Human)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 96T Y17925 Rattus norvegicus (Rat)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10A(WNT10A)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 10A (WNT10A) 96T Y17926 Homo sapiens (Human)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員7B(WNT7B)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7B (WNT7B) 96T Y17927 Homo sapiens (Human)
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3IgG   0.2ml
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr842) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣*激酶3抗體IgG   0.2ml
Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3IgG   0.2ml
Anti-VEGFR-3/FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3抗體IgG   0.2ml
Anti-HSP-70/RBITC  羅丹明標(biāo)記熱休克蛋白-70抗體IgG   0.2ml
Anti-VHL/FITC  熒光素標(biāo)記一種腫瘤抑制因子抗體IgG   0.2ml
Anti-Vimentin/FITC  熒光素標(biāo)記波形蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-Vimentin/Cy3   熒光素Cy3標(biāo)記波形蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-VIP/FITC  熒光素標(biāo)記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgG   0.2ml
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgG   0.2ml
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(N端抗體)IgG   0.2ml
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（N端抗體）IgG   0.2ml
Anti-Visfatin-2(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（C端抗體）IgG   0.2ml
Anti-VPS18/FITC  熒光素標(biāo)記空泡分選蛋白18抗體