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腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；AAV-293實驗方法

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更新時間：2017-07-24 16:34:07瀏覽次數(shù)：280次

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腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；AAV-293實驗方法售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；AAV-293實驗方法
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞
生長特性貼壁生長
特征特性   我們*使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細(xì)胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。跟HEK293細(xì)胞一樣，AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS　
支原體檢測陰性　
STR   Amelogenin:X；CSF1PO:7,11,12；D13S317:12；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D19S433:15,18；D21S11:28,30.2；D2S1338:19；D3S1358:15,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；TH01:7,9.3；TPOX:11；vWA:16,19
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞名稱	腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；AAV-293實驗方法
生長特性	貼壁生長
價格	來電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
肘臀蛋白(CUBN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Cullin 1蛋白(CUL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
降鈣素受體(CTR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鈣聯(lián)接蛋白(CLGN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
嵌合蛋白2(CHN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Cylindromatosis蛋白(CYLD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
細(xì)胞球蛋白(CYGB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
?？康鞍?(DOK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
異連蛋白α(DTNα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Dymeclin蛋白(DYM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
雙氧化酶1(DUOX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
角化不良蛋白(DKC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Dystonin蛋白(DST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
外異蛋白A(EDA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
內(nèi)粘蛋白(EMCN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Enamelin蛋白(ENAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
NCK2/Nck beta NCK銜接蛋白2抗體
NCC27/CLIC1 氯離子通道蛋白27抗體
KAT13A/SRC1 類固醇受體激活蛋白1抗體
NCOA2 類固醇受體激活蛋白2抗體
NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3 類固醇受體激活蛋白3抗體
NCoR1 核受體輔助抑制因子1抗體
NEDD4L/NEDD4-2 泛素連接酶NEDD4-2抗體
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體
NCoR2 核受體輔助抑制因子2抗體
CD10/MME/Neprilysin 金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體
NEDD8 泛素樣蛋白NEDD8抗體
NDRG1/Cap43 分化相關(guān)基因NDRG1抗體
Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體
Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體
NDRG2 抑癌基因NDRG2抗體
NDRG3 抑癌基因NDRG3抗體
NDRG4 抑癌基因NDRG4抗體
Nesfatin-1/Nucb2 新的飽食分子蛋白抗體
NDUFAF4 激素調(diào)節(jié)增值細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體
NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體
NDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquinone) FeS protein 1 (75kD) 線粒體復(fù)合物NDUFS1蛋白抗體
NCX2/SLC8A2 鈉鈣交換蛋白2抗體
NDUFA1 NADH氧化還原酶輔酶1抗體
NDUFA10 NADH氧化還原酶輔酶10抗體
NDUFA8 NADH脫氫酶α家族8抗體
NDUFS3 線粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白抗體
Nebulin 伴肌動蛋白抗體
NDUFS4 線粒體復(fù)合物NDUFS4蛋白抗體
NDUFV1 NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體
NDUFV2 NADH脫氫酶黃素蛋白2抗體
NCX3 鈉鈣交換蛋白3抗體
NCF1 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子1抗體
MG 雞毒支原體抗體