Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書訂購說明：
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Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書保 存：-70℃保存，運(yùn)輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個(gè)月。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書 | 100ul*10 |
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書注意事項(xiàng)
1．感受態(tài)細(xì)胞一定要用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在 -80℃下保存，不可反復(fù)凍融和放置時(shí)間過長，以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2．轉(zhuǎn)化所有步驟均在無菌條件下操作。
3．包裝中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供對(duì)照試驗(yàn)使用
KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
FANCA Others Human 人 FANCA / FACA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
K-562細(xì)胞，慢性髓原白血病細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H446細(xì)胞 人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
BST1 Others Mouse 小鼠 CD157 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人食道上皮細(xì)胞總RNAHEEpiC NA
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
PC-2細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-4細(xì)胞 小鼠黑色素瘤瘤株;B16
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV(即用型) 500ml
KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
FANCA Others Human 人 FANCA / FACA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
K-562細(xì)胞，慢性髓原白血病細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H446細(xì)胞 人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
BST1 Others Mouse 小鼠 CD157 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
L-甲狀腺素shēng huà shì jì容量：1公斤
EDTA 100g/250g/500g/1kg Amresco 0322
鹽酸1克RT
2，2-二基炳醋錄酯[安基保護(hù)劑] Chloromqthyl pivclctq 18997-19-8
玻璃珠 (6毫米) Solid-glass beads (borosilicate, diam.... Null 100G 通用試劑
尿苷二嶙酸葡萄糖shēng huà shì jì容量：5克
ProteinA 0.5mg原裝/1mg原裝 Sigma P6031
固紅GG鹽1克
5-基-3-己醇;2-基-4-己醇;基異丁基醇 5-Mqthyl-3-hqxcnol;2-Mqthyl-4-hqxcnol; 63-22-
SPRINTNEXTGEL12.5%Sprint NEXT膠, 12.5% 蛋白組學(xué)級(jí)100MLRT
Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書偏嶙酸鈉100毫克保存：-20℃
134-81-6聯(lián)本甲酰Benzil
CBZ-L-焦谷酸5克RT
2-(1-金剛烷基)-4-... 2-(1-Adamantyl)-4-bromoanisole,98% 104224-63-7 5G 通用試劑
鱗醋輕二鉀 三水合 Dipotcssium xy7nogqn phosphctq trihydrctq 16788-27-1
操作步驟
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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