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培養(yǎng)基的基本配置方法

閱讀:449發(fā)布時(shí)間:2019-4-17

                                                   培養(yǎng)基的基本配置方法

       培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、碳源、生長(zhǎng)因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。

產(chǎn)品名稱:培養(yǎng)基

英文名稱:Medium

產(chǎn)品成分:水、氮源、無(wú)機(jī)鹽、碳源等

保存方法:防潮、避光、陰涼處保存

保存溫度:2-25℃

特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):維生素、氨基酸、堿基等

作用:供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)

培養(yǎng)基的配制

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調(diào)PH

用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

4.過(guò)濾

濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。(有時(shí)可以省去)

5.分裝

一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的

三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;

固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)

基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。

9.貯存

培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用


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