顆粒培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對(duì)于*和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被，我把方法簡要的列出如下:①親和素*:先親和素先包被載體，加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機(jī)溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
2、包被液的選擇，一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時(shí)由于試驗(yàn)的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應(yīng)注意以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗(yàn)還要有堅(jiān)固的理論外也要實(shí)踐，看一下zui終可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
3、封閉：繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉，比較價(jià)廉，可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動(dòng)物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。但zui終選用什么，要依據(jù)試驗(yàn)具體來實(shí)踐。
顆粒培養(yǎng)基人張力蛋白4(TNS4)免疫試劑盒 Human TNS4 ELISA Kit
人粘蛋白3(MUC3)免疫試劑盒 Human Mucin3,MUC3 ELISA Kit
人粘蛋白2(MUC2)免疫試劑盒 Human Mucin 2,MUC2 ELISA Kit
人增殖誘導(dǎo)配體(APRIL)免疫試劑盒 Human a proliferation inducing ligand,APRIL ELISA Kit
人早期生長反應(yīng)因子1(EGR1)免疫試劑盒 Human EGR1 ELISA Kit
人早期前列腺癌抗原2(EPCA2)免疫試劑盒 Human early prostate cancer antigen 2,EPCA2 ELISA kit
人早期活化抗原CD69(CD69)免疫試劑盒 Human CD69 ELISA kit
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人早老素1(PS-1)免疫試劑盒 Human Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit
人再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白(REG1A)免疫試劑盒 Human REG1A ELISA Kit
人載脂蛋白L1(APOL1)免疫試劑盒 Human APOL1 ELISA kit
人載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒 Human Apo-H ELISA Kit
人載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒 Human Apo-E ELISA Kit
人載脂蛋白C3(Apo-C3)免疫試劑盒 Human Apo-C3 ELISA Kit
人載脂蛋白C2(Apo-C2)免疫試劑盒 Human Apo-C2 ELISA Kit
人載脂蛋白C1(APO-C1)免疫試劑盒 Human Apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit
人載脂蛋白B48(apo-B48)免疫試劑盒 Human Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit
人載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒 Human Apo-B100 ELISA Kit
人載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒 Human apo-A5 ELISA Kit
人載脂蛋白A4(Apo-A4)免疫試劑盒 Human Apo-A4 ELISA Kit
人載脂蛋白A2(apo-A2)免疫試劑盒 Human Apolipoprotein A2,apo-A2 ELISA Kit
人載脂蛋白A1(Apo-A1)抗體 免疫試劑盒 Human anti-apolipoprotein A1(Apo-A1)antibody ELISA Kit
人載脂蛋白A1(Apo-A1)免疫試劑盒 Human Apo-A1 ELISA Kit
人運(yùn)甲狀腺素蛋白/前白蛋白(TTR)免疫試劑盒 Human TTR ELISA Kit
人孕烯醇酮(PREG)免疫試劑盒 Human pregnenolone,PREG ELISA kit
人孕酮受體(PGR)免疫試劑盒 Human PGR ELISA Kit
人孕酮和adipoQ 受體家族成員Ⅶ(PAQR7)免疫試劑盒 human progestin and adipoQ receptor family member Ⅶ,PAQR7 ELISA Kit
人孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)免疫試劑盒 Human progesterone induced blocking factor,PIBF Elisa kit
人孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒 Human Progesterone,PROG ELISA kit
人鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)抗體(IgM)免疫試劑盒 Human keyhole limpet hemocyanin(KLH)antibody IgM ELISA Kit
人鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human keyhole limpet hemocyanin(KLH)antibody IgG ELISA Kit
人遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1(FUBP1)免疫試劑盒 Human far upstream element binding protein 1,FUBP1 ELISA kit顆粒培養(yǎng)基
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