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檢測(cè)5hmc羥化酶TET的活性，這樣做最省事

閱讀：363發(fā)布時(shí)間：2021-4-1

很多研究表明，5hmC 表達(dá)水平與基因表達(dá)調(diào)控、多能干細(xì)胞分化、神經(jīng)元發(fā)育、以及腫瘤發(fā)生都密切相關(guān)。

 

人TET蛋白家族包含TET1、TET2和TET3這3個(gè)成員，所有TET蛋白都包含一個(gè)保守的雙鏈β-螺旋結(jié)構(gòu)域、一個(gè)富含半*區(qū)和C端的核心催化結(jié)構(gòu)域。而研究表明，基因組5hmC 水平與 TET 羥化酶活性相關(guān)。

 

那么如何檢測(cè)5hmc羥化酶TET的活性呢？不妨來(lái)看下Nature同款方案：

1.jpg

以5mC-羥化酶TET活性/抑制分析試劑盒【5mC-Hydroxylase TET Activity/Inhibition Assay Kit】為例分析說(shuō)明，該試劑盒有比色法（#P-3086）和熒光法（#P-3087）兩種。

 

實(shí)驗(yàn)原理：甲基化底物被穩(wěn)定地包埋在微孔板上?；钚?nbsp;TETs (客戶提供)與底物結(jié)合，并將甲基化底物轉(zhuǎn)化為羥甲基化產(chǎn)物。Tet- 轉(zhuǎn)化的羥甲基化產(chǎn)物可以被特異性抗體識(shí)別。羥甲基化產(chǎn)物的比例或數(shù)量與酶的活性成正比，然后可以通過(guò)讀取波長(zhǎng)為450nm的吸光度或者熒光強(qiáng)度來(lái)對(duì)比分析。TET 酶的活性與測(cè)得的光強(qiáng)度成正比。

 

適用樣本：TET酶的細(xì)胞核提取物；純化的TET酶（TETs, 1-3）

 

性能展示：

2.jpg

 

 

文章來(lái)源：艾美捷科技


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