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m6A RNA定量丨甲基轉(zhuǎn)移酶丨抗體研究方案

閱讀:193發(fā)布時間:2021-2-4

m6A三大研究領(lǐng)域:m6A RNA的定量; m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶和去甲基化酶活性分析;m6A RNA富集、RNA特異性甲基化分析和文庫建立。前面已經(jīng)分析過病毒m6A RNA的定量,接下來看看后面這兩塊領(lǐng)域吧。

 

一、m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶和去甲基化酶活性分析

 

如果你計劃研究RNA甲基化酶或去甲基化酶的活性/抑制,可以使用核提取試劑盒,它速度快,確保分離后酶活性保持不變。一旦收集到核提取液,就可以進入有助于測量甲基化酶或去甲基化酶活性/抑制的檢測。比如比色ELISA試劑盒,cat# P-9013,它允許對提取的核樣品進行高通量或手動通量分析,并進行了優(yōu)化,以確保背景信號保持在較低水平,因此測量是準(zhǔn)確和可靠的。

 

一旦工作流程中的其他步驟完成,一項研究可能會尋求富集基因組中存在m6A的部分,并通過構(gòu)建文庫為下一代測序準(zhǔn)備這些片段。EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq試劑盒,cat# P-9018,允許富集m6A RNA,同時也為構(gòu)建文庫提供了額外的功能。

 

二、m6A RNA抗體

 

m6A是zui豐富的mRNA修飾,因此,通常是研究表觀遺傳RNA修飾的研究人員感興趣的主題。此類研究通常包含單克隆抗體和多克隆抗體,以驗證結(jié)果并幫助了解一旦宿主感染后這種特定修飾如何影響病毒的發(fā)展和疾病的影響。

 

N6-甲基腺苷(m6A)多克隆抗體,cat# A-1801,經(jīng)過驗證的應(yīng)用。DB、ELISA、ICC、IP、MeRIP、核苷酸陣列。

 

另外,很多朋友想知道這個抗體是否可以做WB?這個可以有,比如Synaptic Systems(SySy)可做WB的m6A抗體(m6A - 202 003、m6A - 202 011、m6A - 202 111),這三種抗體被諸多高分文章引用。

 

zui后總結(jié)一下,病毒RNA m6A研究流程與普通的組織和細(xì)胞樣本的區(qū)別:

 

試劑盒一樣,方法一樣,區(qū)別就在于,病毒RNA的量和純度問題,這個會影響整個實驗流程,所以為了更好地完成實驗課題,前提是需要制備好病毒RNA樣本。

 

文章來源:艾美捷科技


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