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閱讀:402發(fā)布時間:2020-12-3
近年來研究發(fā)現(xiàn)多種細胞在不同因子作用下發(fā)生凋亡時均伴有線粒體膜電位(Mitochondrial membrane potential,MMP)的下降,線粒體氧化磷酸化過程中起偶聯(lián)作用的MMP在細胞凋亡早期病理變化以前就開始下降,該過程早于DNA丨片段化,目前線粒體膜電位下降被廣泛認為是細胞凋亡過程中早發(fā)生的事件之一。
那么,什么是線粒體膜電位(MMP)呢?它的研究工具線粒體膜電位熒光探針又有哪些呢?咱們一起來看看吧!
1.TMRM
Tetramethylrhodamine, methyl ester (TMRM)也是一種可透過細胞膜的陽離子熒光染料,單激光激發(fā)和單熒光發(fā)射峰??捎?43nm激光激發(fā),發(fā)射橙紅色熒光波長在580nm左右。相對其他熒光探針,TMRM具有許多優(yōu)點如染料在線粒體積累僅源于膜電位變更;相對毒性更?。缓图毎鹘Y(jié)合率低;適合做線粒體膜電位的定量分析等。
2.Rhodamine 123
Rhodamine 123(羅丹明123)是一種可透過細胞膜的陽離子熒光染料,在正常細胞中能夠依賴線粒體跨膜電位進入線粒體基質(zhì),熒光強度減弱或消失。在細胞凋亡發(fā)生時,線粒體膜完整性破壞,線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運孔開放,引起線粒體跨膜電位(ΔΨm) 的崩潰,Rh123 重新釋放出線粒體,從而發(fā)出強黃綠色熒光,通過熒光信號的強弱來檢測線粒體膜電位的變化和凋亡的發(fā)生,可用于培養(yǎng)的細胞或從組織中提取出的線粒體的膜電位檢測。
3.JC-1
JC-1也稱CBIC2(3),是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針??梢詸z測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時JC-1為單體(monomer),可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。JC-1單體可采用488或514nm激光激發(fā),發(fā)出綠色熒光波長為529nm左右;JC-1聚合物(J-aggregates)的zui大激發(fā)波長為585nm,發(fā)出紅色波長為590nm。
關(guān)于以上研究工具,對應(yīng)的研究產(chǎn)品有Cell Meter 線粒體膜電位測定試劑盒(貨號:22804)何Cell Meter NIR線粒體膜電位檢測試劑盒(貨號:22803),不同的研究工具對應(yīng)不同的線粒體膜電位變化,參考一下圖表
用Cell Meter 線粒體膜電位測定試劑盒*適合流式細胞儀 橙色熒光*檢測FCCP誘導(dǎo)的線粒體膜電位變化
用Cell Meter NIR線粒體膜電位檢測試劑盒檢*適合微孔板檢測測FCCP誘導(dǎo)的線粒體膜電位變化
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