多重PCR（multiplex PCR），又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR，它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對(duì)以上引物，同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段的PCR反應(yīng)。其反應(yīng)原理，反應(yīng)試劑和操作過(guò)程與一般PCR相同，但多重PCR和在很多應(yīng)用中有巨大的優(yōu)勢(shì)，深受分子診斷領(lǐng)域研究者與的喜愛(ài)：
1.高通量 (每個(gè)反應(yīng)孔可分析更多樣本，產(chǎn)出顯著提高)
2.更低的樣本用量和試劑用量（特別適合樣品，降低成本）
3.更高的實(shí)驗(yàn)精度，使加樣精度錯(cuò)誤小化
目前多重PCR也面臨著一些問(wèn)題：
1.PCR通常需要充分優(yōu)化退火條件，以便對(duì)不同的引物–模板系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)*效率的擴(kuò)增。這種類型的PCR經(jīng)常受到非特異性PCR產(chǎn)物的影響。嚴(yán)格的熱啟動(dòng)程序和特別優(yōu)化的緩沖溶液系統(tǒng)對(duì)于成功的多重PCR是非常關(guān)鍵的。
2.多重PCR所面對(duì)的另外一個(gè)挑戰(zhàn)是，不同的引物對(duì)之間，雜交動(dòng)力學(xué)性質(zhì)不同。結(jié)合效率更高的引物能更充分的利用PCR反應(yīng)試劑，從而導(dǎo)致其它PCR產(chǎn)物的減少。這通常會(huì)導(dǎo)致一些本應(yīng)該被擴(kuò)增的產(chǎn)物沒(méi)有出現(xiàn)。有一些商業(yè)化的試劑盒經(jīng)過(guò)特別的設(shè)計(jì)，可以避免這種情況。
Real-time RT-PCR可以通過(guò)一步法或者兩步法完成，兩者各有優(yōu)劣。一步法快速的流程，可以迅速的處理多個(gè)樣本，并且易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。操作步驟的減少提高了不同樣本結(jié)果的可重復(fù)性，并且由于減少了操作，降低了樣本被污染的風(fēng)險(xiǎn)。
為此，我們推薦使用Solis BioDyne研發(fā)的高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性的一步法多重PCR試劑盒-（基于探針），SOLIScript 1-step Multiplex Probe 試劑盒系列產(chǎn)品：
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit | 08-55-00250 | 所有PCR儀器；但Applied BioSystems™和Agilent除外 | |
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (ROX) | 08-59-00250 | Applied BioSystems™ 和Agilent的PCR儀器 | ROX JUN Texas Red |
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (Purple) | 08-61-00250 | Applied BioSystems™ PCR儀器（需含Mustang Purple®通道） | Cy5 |
SOLIScript™ 1-step Multiplex Probe Kit（一步法多重PCR試劑盒-基于探針）可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如下：
1.的特異性：獨(dú)*改造的耐熱型逆轉(zhuǎn)錄酶，cDNA合成高達(dá)60℃。
2.多重反應(yīng)（高通量）：一個(gè)反應(yīng)可同時(shí)分析1-4個(gè)靶標(biāo)。
3.反應(yīng)體系配置，無(wú)需冰塊：磚利的蛋白穩(wěn)定技術(shù)，即使室溫保存有效期高達(dá)30天。
4.無(wú)懼高GC含量PCR：獨(dú)*優(yōu)化的buffer配方。
5.預(yù)防交叉污染：內(nèi)含dUTP，可匹配*糖苷酶（UNG）使用。
6.廣泛的設(shè)備兼容性：如上
試劑盒組分：
1.5x One-step Multiplex Probe Mix：
HOT FIREPol® DNA聚合酶，反應(yīng)緩沖液, dNTPs（含dUTP）, 15 mM MgCl2 (終濃度為3 mM MgCl2）
2.40x One-step SOLIScript Mix：
SOLIScript逆轉(zhuǎn)錄酶, RiboGrip RNase Inhibitor（RNase強(qiáng)效結(jié)合蛋白，抑制RNA降解）
3.Water（無(wú)核酸酶）
可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：
對(duì)提取的人來(lái)源的總RNA進(jìn)行5個(gè)濃度梯度的10倍稀釋（每個(gè)反應(yīng)：4000pg/ul - 0.4pg/ul），各濃度樣品均使用Solis BioDyne的一步法多重PCR試劑盒，同時(shí)分析4個(gè)靶標(biāo)。PCR儀器為：Applied BioSystems™ QuantStudio™ 6 cycler。
除了上述的的分子診斷研發(fā)神器，Solis BioDyne為客戶提供終點(diǎn)PCR（end-point PCR），qPCR（real-time PCR），反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse transcription），以及其它PCR所需的配套試劑。產(chǎn)品線縱覽圖如下：
Solis BioDyne來(lái)源于歐盟-愛(ài)沙尼亞共和國(guó)，自1995年以來(lái)，Solis BioDyne一直致力于開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)高品質(zhì)的生命科學(xué)試劑，現(xiàn)已成為當(dāng)今歐洲領(lǐng)*的試劑供應(yīng)商之一。高標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和服務(wù)使Solis BioDyne成為值得信賴的首*PCR供應(yīng)商。我們的DNA聚合酶，PCR Master Mixes，qPCR Mixes和其它試劑被110多個(gè)國(guó)家的研究者所使用，包括頂*研究機(jī)構(gòu)和生物技術(shù)公司。
Solis BioDyne擁有獨(dú)*的蛋白質(zhì)穩(wěn)定技術(shù)磚利，確保其PCR酶與PCR Mixes產(chǎn)品具有*的穩(wěn)定性，研究者可以常溫運(yùn)輸以及常溫下配置PCR反應(yīng)體系（無(wú)需冰盒）。即使是室溫放置30天，其酶活性也沒(méi)有損耗。
作為Solis BioDyne在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的Solis BioDyne產(chǎn)品以及訂制服務(wù)。
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