接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol價(jià)格產(chǎn)品及特點(diǎn): 本產(chǎn)品利用 Taq DNA polymerase 的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性, 在只有 dATP 存在的情況下,在平末端的 DNA 片段加上一個(gè) dA 尾巴,使平 末端片段也能被 T 載體克隆。 1. 簡(jiǎn)單,2 X Tailing Buffer 中含有所需要的所有成分,不需要單獨(dú)準(zhǔn)備。 2. 適用于任何平末端的 DNA 片段,包括 Pfu DNA polymerase 等酶合成 的 DNA 片段。 3. 產(chǎn)物可以直接用于與 T 載體的連接。 接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol價(jià)格產(chǎn)品介紹:
接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol價(jià)格使用方法: 一:反應(yīng)前純化處理: 用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶 擴(kuò)增得到的 DNA 片段,必須經(jīng)過(guò)*的去除殘留的酶的處理過(guò)程(如酚/抽提或 Proteinase K 處理),否則它們將在加 A 反應(yīng)時(shí),切除掉加上的 A 尾巴,干擾反應(yīng)??梢圆扇∧z回收和酚/抽提法等常規(guī)方法純化,zui后溶 解在水或 TE 中,終濃度以 0.1 ug/uL 為宜。 二:加 A 反應(yīng) 在干凈的 0.5 mL 或 1.5 mL 離心管中,分別加入下列成分: 回收的 DNA 片段(0.2-2 ug) 25 uL 2 X dA Tailing Buffer 1 uL Taq DNA polymerase(5 U/uL) 補(bǔ)水到 50 uL 72℃保溫 2 小時(shí) 三:反應(yīng)后處理 加 A 反應(yīng)后,Taq DNA polymerase 將與 DNA 末端緊密結(jié)合,所以必 須酚/抽提去除。如果使用 Proteinase K 處理后再用酚/抽提效果會(huì) 更好。得到的 DNA 溶于適量水和 TE 中后即可用于 T 載體的連接反應(yīng)。