真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次實(shí)驗(yàn)方法

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次實(shí)驗(yàn)方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)檢定氨、銻、〖砷〗、鈦、硝酸鹽和亞硝酸鹽；測(cè)定氨、鈦和〖硫酸鹽〗
〖保存〗：RT
羅丹明123
〖英文名稱〗：Rhodamine 123；2-(6-Amino-3-imino-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid methyl ester
〖其他名稱〗：若丹明123
〖CAS號(hào)〗：62669-70-9
C21H17ClN2O3=380.82
〖級(jí)別〗：BioChemika
〖含量〗：≥90.0%
水分：≤10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅色至褐色粉末，溶于乙醇
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
羅丹明B
〖英文名稱〗：Rhodamine B；Rhodamine 610；Rhodamine O；Brilliant pink B；Tetraethyl rhodamine；C.I Basic violet10；C.I Food red 15；Pilot578
〖其他名稱〗：玫瑰紅B；堿性紫10；四乙基羅丹明；若丹明B；羅丹明610；蕊香紅B；玫瑰精B；藍(lán)光堿性蕊香紅；堿性桃紅；9-(2-羧基苯基)-3,6-雙(二乙氨基)占噸翁〖氯化物〗；堿性玫瑰精；堿性玫瑰精B

小 RNA 克隆試劑盒   液相內(nèi)毒素清除劑
DNA 去磷酸化試劑盒   一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 )
天凈沙細(xì)胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒    一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )
絲狀真菌線粒體 DNAout   一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)
天凈沙通用型MLPA 試劑盒   一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)
LAMP 可見光染料   一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 真空法)
RNase 抑制劑 ( 豬源 )   一步法大提質(zhì)粒 DNAout
低熔點(diǎn)瓊脂糖   一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout
低熔點(diǎn)瓊脂糖   一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout
Red-Tth DNA 聚合酶   一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0
Red-Pfu DNA 聚合酶   一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0
Red-KOD DNA 聚合酶   一步離心式石蠟清除劑
MgSO4溶液，10mM，PCR    一步式 PAGE 染液
石蠟油，PCR    一步式 RT-PCR Mix
葡萄球菌 RNAout   一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒
分枝桿菌 RNAout   一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒
柱式葡萄球菌 RNAout   一步式廣譜 DNAout
柱式分枝桿菌 RNAout   一步式細(xì)菌 DNAout
白色念珠菌 RNAout   一管式 DNA 膠回收試劑盒
Ⅰ DNA   一管式植物 DNAout
   一站式蛋

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