昆蟲(chóng)種屬鑒定 PCR Mix100 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
昆蟲(chóng)種屬鑒定 PCR Mix100 次實(shí)驗(yàn)步驟合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 總 SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (NBT 法 )
山羊抗人 IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 總 SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (WST 法 )
兔抗雞 IgY，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 總*過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒
驢抗山羊 IgG，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 總*檢測(cè)試劑盒
山羊抗小鼠 IgG，熒光素 488 標(biāo)記 總抗氧化能力測(cè)試盒 ( 比色法 )
山羊抗小鼠 IgG，熒光素 555 標(biāo)記 總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒 (ABTS 法 )
山羊抗兔 IgG，異硫氰酸熒光素標(biāo)記 總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒 (ABTS 快速法 )
山羊抗兔 IgG，藻紅蛋白標(biāo)記 總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒 (FRAP 法 )
山羊抗兔 IgG，熒光素 488 標(biāo)記 總基測(cè)試盒 / 總脂酶測(cè)試盒
山羊抗兔 IgG，熒光素 555 標(biāo)記 *標(biāo)簽蛋白染色試劑盒
山羊抗小鼠 IgG，異硫氰酸熒光素標(biāo)記 組蛋白
山羊抗小鼠 IgG，藻紅蛋白標(biāo)記 組蛋白 3.1 小鼠單抗
WarmStart Bst DNA 聚合酶 組蛋白 3.1 小鼠單抗
4× 核酸液相雜交液 組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑
DNA 溶解液 α
免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒 α- *
ECL 法*雜交檢測(cè)試劑盒 α- 環(huán)狀糊精
10mg/mL β
φX174RF Ⅰ DNA
〖英文名稱〗：3,3'-Dimethoxybenzidine；o-Dianisidine；Fast blue B
〖其他名稱〗：聯(lián)大茴香胺；二甲氧聯(lián)苯胺；3,3′-二甲氧基-4,4′-二氨基聯(lián)苯；3，3-二甲氧基聯(lián)苯胺；3,3'-二甲氧基-1,1'-聯(lián)苯-4,4'-二胺；鄰二茴香胺；聯(lián)甲氧基苯胺；鄰聯(lián)大茴香胺
〖CAS號(hào)〗：119-90-4
C14H16N2O2=244.29
〖級(jí)別〗：試劑級(jí)
〖含量〗：≥98.0%
水溶解試驗(yàn)：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色至淺灰棕色粉末，在空氣中變成紫堇色。溶于乙醇、乙迷和苯、水?！既埸c(diǎn)〗 137-138℃。閃點(diǎn)206℃。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)檢定鈷、銅、金、釩、硫酸鹽（Au, Co, Cu, SCN-, V），測(cè)定金和亞硝酸鹽（Au, NO2-, Ce(IV) ）(spectrophotometric)。氧化還原指示劑。絡(luò)合指示劑?！急４妗剑篟T，避光
鄰聯(lián)茴香胺鹽酸鹽
〖英文名稱〗：3,3'-Dimethoxybenzidine dihydrochloride；o-Dianisidine dihydrochloride
〖其他名稱〗：聯(lián)大茴香胺鹽酸鹽；3,3’-二甲氧基聯(lián)苯胺鹽酸鹽；聯(lián)大回香胺鹽酸鹽；快藍(lán)B；二鹽酸鄰聯(lián)茴香胺；3,3’-二甲氧基-(1,1’-聯(lián)苯基)-4,4’-二胺鹽酸鹽；鄰聯(lián)大茴香胺鹽酸鹽；鹽酸-3，3′-二甲氧基-4，4′-二氨基聯(lián)苯
〖CAS號(hào)〗：20325-40-0
C14H16N2O2?2HCl=317.21
〖級(jí)別〗：BR
會(huì)員1.png)
