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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-19 15:55:30瀏覽次數(shù):476次
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UTP 溶液,2.5mM2mL價(jià)格運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
UTP 溶液,2.5mM2mL價(jià)格合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
UTP 溶液,2.5mM2mL價(jià)格按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
PH變色域:pH 1.2(紅)~2.8(黃); pH 7.4(黃)~9.0(紅紫)
乙醇溶解試驗(yàn):合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕綠色細(xì)小結(jié)晶性粉末。易溶于乙醇、甲醇、冰乙酸和堿溶液,在乙酸中呈黃色溶液,稀堿液和氨水中呈紅紫色,微溶于水,不溶于乙迷、苯、氯方、四錄化碳和乙酸乙酯。zui大吸收波長 579(371)nm
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑
〖保存〗:RT
二苯胺磺酸鈉
〖英文名稱〗:Diphenylaminesulfonic acid sodium salt;Sodium diphenylamine-4-sulfonate
〖其他名稱〗:二苯胺-4-磺酸鈉;4-(苯氨基)苯磺酸單鈉鹽;4-二苯胺磺酸鈉;二苯胺對磺酸鈉;二苯基氨基-4-磺酸鈉
〖CAS號〗:6152-67-6
C12H10NNaO3S=271.27
〖級別〗:IND
對硝酸鹽靈敏度:合格
對氧化劑靈敏度:合格
水中溶解試驗(yàn):合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色或淺黃色結(jié)晶性粉末。對濕敏感。溶于水和熱乙醇。zui大吸收波長290~295nm(水中)。有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)氧化還原指示劑
RsaI DNA Tris HCl,1M,pH7.0
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝帶芯 ) DNA Tris HCl,1M,pH7.5
SacI DNA Tris HCl,1M,pH8.0
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝 ) DNA Tris HCl,1M,pH8.5
SalI DNA Tris HCl,1M,pH9.0
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 ) DNA CTAB( 十六烷基*基* )
SmaI DNA DTT( 二硫代蘇糖醇 )
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 ) DNA EDTA 2Na
XbaI DNA Guanidine HCl( 鹽酸胍 )
XhoI DNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )
ATP 檢測試劑盒 DNA 2-Mercaptoethanol(2- 基乙醇 )
ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜不需高速離心 ) DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜需高速離心 ) DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸鈉 )
Catalase( 抗氧化酶 )
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