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ATP 溶液,100mM0.25mL實驗方法

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-19 15:51:16瀏覽次數(shù):395次

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產(chǎn)品簡介

ATP 溶液,100mM0.25mL實驗方法運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

ATP 溶液,100mM0.25mL實驗方法產(chǎn)品介紹:

ATP 溶液,100mM0.25mL實驗方法產(chǎn)品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個小片段)。

〖級別〗:BS
生物染色實驗:合格
PH:9.4~14.0
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深藍(lán)色粉末。易溶于水呈藍(lán)色,不溶于乙醇。在濃硫酸中呈紅棕色,當(dāng)稀釋后呈藍(lán)紫色。zui大吸收波長607nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)動物組織學(xué)的復(fù)染劑。原生動物活體染色、細(xì)菌染色、神經(jīng)細(xì)胞染色
〖保存〗:RT
7-氨基-4-甲基香豆素
〖英文名稱〗:AMC;7-amino-4-methylcoumarin;Coumarin 120;7-Amino-4-methyl-2H-chromen-2-one;4-Methyl-7-aminocoumarin 
〖其他名稱〗:香豆素120 
〖CAS號〗:26093-31-2 
C10H9NO2=175.18
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥98.0%
〖熔點〗:224~230℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色至黃綠色結(jié)晶粉末。溶于甲醇、乙醇、乙二醇,微溶于水,其溶液呈略帶紫的藍(lán)色熒光
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)適用于以閃光燈、氮分子、氬離子、YAG-TH grass、-THX-eCl等為泵浦光源的可調(diào)諧染料激光器。是一種激光轉(zhuǎn)化率較高、穩(wěn)定性好的激光染料,屬藍(lán)綠波段。熒光標(biāo)記試劑,用于痕量檢測酶。

*酯酶測試盒    MTT 檢測試劑盒
蛋白去除試劑 M    DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)(50-400 bp)
蛋白去除試劑 S    DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)(300-5000 bp)
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測試盒    DOP-PCR 試劑盒
肝 / 肌糖元測試盒     一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
*測試盒    一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝
*過氧化物酶檢測試劑盒    痰液 DNAout
*還原酶檢測試劑盒    非凍型血液 RNA 保存液
*一還原酶測試盒    非凍型血液 RNA 保存液
過氧化氫測試盒    綠如藍(lán)蛋白染液
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )    DNA 洗脫液 2.0
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )    動物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )
過氧化氫酶測試盒 ( 可見光比色法 )    動物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )
酸脫氫酶測試盒    


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