即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次說(shuō)明書(shū)合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。
〖保存〗：RT，避光。保質(zhì)期5年
D-蟲(chóng)熒光素游離酸
〖英文名稱(chēng)〗：D-Luciferin；Firefly Luciferin；(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid；4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid
〖其他名稱(chēng)〗：(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸；D-熒光素；D-冷光素
〖CAS號(hào)〗：2591-17-5
C11H8N2O3S2=280.32
〖級(jí)別〗：BR
純度：≥98.0%
〖熔點(diǎn)〗：201～204°C
Maximum UV absorption：533 nm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：類(lèi)白色至淡黃色粉末。溶于甲醇：10mg/ml；也溶于DMSO：50mg/ml
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)化學(xué)發(fā)光試劑
〖保存〗：2～8℃。保質(zhì)期2年
D-蟲(chóng)*
〖英文名稱(chēng)〗：D-Luciferin sodium salt；Firefly luciferin sodium salt；(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid sodium salt；4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt
〖其他名稱(chēng)〗：(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鈉鹽；D-*鹽；(S)-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-2-噻唑啉-4-羧酸鈉；4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑羧酸鈉；D-冷光素鈉鹽
〖CAS號(hào)〗：103404-75-7
C11H7N2NaO3S2=302.3
〖級(jí)別〗：BR
增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒 柱式昆蟲(chóng) mtDNAout，測(cè)序
BCIP/NBT 顯色試劑盒 百萬(wàn)堿基細(xì)菌 (G-)DNAout
Tricine-SDS-PAGE 配膠液 百萬(wàn)堿基細(xì)菌 (G+)DNAout
Tricine-SDS-PAGE 配膠液 Southern 細(xì)菌 (G-)DNAout
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 ) Southern 細(xì)菌 (G+)DNAout
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 ) M13 噬菌體單鏈基因組 DNAout
大片段 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn) λ 噬菌體 DNAout
離心管 ( 配研磨杵用 ) 柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout
離心管 ( 配研磨杵用 ) 大提柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout
沉淀法 miRNA 分離試劑盒 柱式醬油 DNAout
RNase A 干粉 免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒
RNase A 干粉
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