探針標(biāo)記 PCR Mix 0.5mL說明書

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更新時間：2017-01-19 14:25:34瀏覽次數(shù)：425次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

全部產(chǎn)品列表

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

探針標(biāo)記 PCR Mix 0.5mL說明書運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

探針標(biāo)記 PCR Mix 0.5mL說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
探針標(biāo)記 PCR Mix 0.5mL說明書按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品及特點(diǎn):

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。

C28H19N5Na2O6S4=695.72
〖級別〗：IND
〖含量〗：≥65%
pH變色域：11.0（黃色）～13.0（紅色）
溶解度試驗(yàn)：合格
干燥失量：≤10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：淺黃棕色粉末。對光敏感。溶于水、乙醇(呈黃色溶液)、氫氧溶液(呈紅黃色)、硫酸(呈棕黃色)。zui大吸收波長 402nm
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)光度測定鎂。檢定硼和鎂。酸堿指示劑，pH11.0(黃)～13.0(紅)。生物染色劑。顯微鏡檢查法用熒光指示劑。吸附指示劑
〖保存〗：RT，避光。保質(zhì)期5年
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基本胺鈉鹽
〖英文名稱〗：TOOS sodium salt；Sodium 3-(N-ethyl-3-methylanilino)-2-hydroxypropanesulfonate；3-(N-Ethyl-3-methylanilino)-2-hydroxypropanesulfonic acid sodium salt
〖其他名稱〗：N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)間甲苯胺鈉鹽
〖CAS號〗：82692-93-1
C12H18NNaO4S=295.33
〖級別〗：試劑級
〖含量〗：≥98%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色結(jié)晶粉末。溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于酶光度法測定過氧化輕。
〖保存〗：RT，避光。保質(zhì)期5年

膜結(jié)合 DNA 清除試劑盒   DTT，免稱量蛋白
冰袋   TCEP 鹽酸膦
一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 )    TCEP 溶液，0.5M
一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )    鈷柱介質(zhì)
柱式骨骼 DNAout   咪唑
非凍型拭子病毒保存液   亞氨二乙酸介質(zhì)
Denhardt 溶液，50×   GST 固定試劑盒
Denhardt 溶液，50×   * S 轉(zhuǎn)移酶
Hanks 溶液   細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒   磷酸化蛋白富集試劑盒
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒   ConA 糖蛋白分離試劑盒
SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒   還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒
SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒   牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2mg/mL
o-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒

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