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dNTP 溶液，100mM 5mL原理

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

dNTP 溶液，100mM 5mL原理運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

dNTP 溶液，100mM 5mL原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
dNTP 溶液，100mM 5mL原理產(chǎn)品介紹：
合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

C3H5KO3=128.17
〖級(jí)別〗：AR
〖含量〗：≥60%水溶液
密度（20℃）：1.32～1.35g/ml
〖重金屬〗：≤0.001%
〖氯化物〗：≤0.05%
〖鐵〗鹽：≤0.001%
〖硫酸鹽〗：≤0.005%
鈣鹽：≤0.002%
〖〖砷〗鹽〗：≤0.0002%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：無(wú)色或微黃色、微粘性澄清液體，無(wú)味或輕微特殊氣味
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
檸檬酸〖鋅〗
〖英文名稱〗：Zinc citrate；Zinc chromate(VI)
〖其他名稱〗：枸櫞酸〖鋅〗；〖鋅〗鉻黃；〖鋅〗黃；2-羥基-1,2,3-丙烷*酸〖鋅〗鹽；檸檬酸三〖鋅〗；2-羥基丙烷-1,2,3-三羧酸〖鋅〗
〖CAS號(hào)〗：546-46-3

1，3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷   Catalase( 抗氧化酶 )
*   CuZn/Mn-SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (WST 法 )
碘乙酸   GSH—PX 測(cè)試盒
*   GSH—ST 測(cè)試盒
秋水仙素   GSH 和 GSSG 試劑盒
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 2B   GSH 試劑盒 ( *測(cè)試盒 )( 比色法 )
丙烯葡聚糖凝膠 S-100 HR   H5N1 神經(jīng)氨酸酶抑制劑鑒定試劑盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-200 HR   NF-κB 激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-300 HR   ROS 活性氧檢測(cè)試劑盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-400 HR   丙二醛測(cè)試盒 / 脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-500 HR   超微量 ATP 酶測(cè)試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)
QAE 葡聚糖凝膠 A-25   超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+ATPase)
胸腺嘧啶   超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+Mg2+ATPase)
過(guò)氧化氫定量分析試劑盒