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dNTP 溶液，2.5mM0.5mL說(shuō)明書(shū)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

dNTP 溶液，2.5mM0.5mL說(shuō)明書(shū)運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

dNTP 溶液，2.5mM0.5mL說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
dNTP 溶液，2.5mM0.5mL說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品介紹：
合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

〖級(jí)別〗：BR
純度：≥98.0%
〖干燥失重〗：≤2.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或淺藍(lán)色至藍(lán)綠色結(jié)晶或粉末，無(wú)臭，極易溶于水，難溶于乙醇
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：RT
葡萄糖酸鉀
〖英文名稱(chēng)〗：Potassium gluconate；D-Gluconic acid monopotassium salt；Gluconic acid potassium salt
〖其他名稱(chēng)〗：葡糖酸鉀鹽；D-葡糖酸鉀
〖CAS號(hào)〗：299-27-4
C6H11KO7=234.24
〖級(jí)別〗：AR
〖含量〗：≥99.0%
還原物：≤1.0%
〖干燥失重〗：≤3.0%
〖重金屬〗：≤20ppm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或類(lèi)白色結(jié)晶或粉末
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT

L- *   酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒
次(亞)甲基蘭   胎盤(pán)*
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷   糖化血清蛋白測(cè)試盒 ( 果糖胺法 )( 帶標(biāo)準(zhǔn) )
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷   唾液酸測(cè)試盒 ( 帶 SA 標(biāo)準(zhǔn) )
臺(tái)盼藍(lán)   微量丙二醛測(cè)試盒 / 脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試盒
小牛胸腺 DNA   維生素 C 測(cè)試盒
胰蛋白胨   *測(cè)試盒
L- *   一氧化氮合成酶測(cè)試盒
腺嘌呤   一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 )
L- 異*   一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )
*   乙酰*酯酶測(cè)試盒
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸   乙酰*轉(zhuǎn)移酶測(cè)試盒
N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸   抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基測(cè)試盒 ( 比色法 )
N- 氨基甲酰甲基乙磺酸   游離脂肪酸測(cè)試盒
5′ - 二磷酸鳥(niǎo)苷二鈉