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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-18 14:55:15瀏覽次數(shù):410次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 智慧城市網(wǎng)X 光片 (5×7 英寸 )1盒圖片運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
X 光片 (5×7 英寸 )1盒圖片磷酸化反應(yīng)(前反應(yīng)):
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液:
2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記:
當(dāng)摻入水平很低的時(shí)候,需要使用本步驟,即通過(guò)體積排阻色譜或過(guò)濾試 劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱(需另購(gòu))對(duì)于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個(gè)堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來(lái)純化長(zhǎng)度不小于 10 個(gè) 堿基的寡核苷酸。
X 光片 (5×7 英寸 )1盒圖片使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補(bǔ)足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長(zhǎng) 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
X 光片 (5×7 英寸 )1盒圖片產(chǎn)品介紹:
X 光片 (5×7 英寸 )1盒圖片磷酸化反應(yīng)標(biāo)記:
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個(gè)微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
dITP 溶液,100mM 0.5mL 健那綠 B
dATP 溶液,2.5mM 2mL 4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚
dATP 溶液,100mM 0.5mL 3- 異丁基 -1- 甲基黃嘌呤
dTTP 溶液,2.5mM 2mL 咪唑
dTTP 溶液,100mM 0.5mL n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
dGTP 溶液,2.5mM 2mL 苦杏仁苷
dGTP 溶液,100mM 0.5mL 化硝基四氮唑蘭
dCTP 溶液,2.5mM 2mL 噻唑蘭
dCTP 溶液,100mM 0.5mL 2,3,5化三苯基四氮唑
Deaza dGTP 0.4mL 吩嗪硫酸甲酯
雙脫氧 dNTP 套裝 40uL×4 3- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸
dNTP 和引物清除劑 100 次 脫氧膽酸鈉
X 光片 (5×7 英寸 )1盒圖片OCTYL-THIOGLUCOSIDE辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷超純級(jí)白色固體FRZsigma
Gold金粉500克BR,90%
TAPS,SODIUMSALTTAPS Na生物技術(shù)級(jí)白色粉末RTsigma
Glycinetertbutylesterhydrochloride鹽酸*叔丁酯5克BR,98%
AGAR,BACTERIOLOGICAL細(xì)菌瓊脂細(xì)菌學(xué)級(jí)白色至淡奶油粉末RTsigma
GinsenosideRf人參皂甙Rf5克色固
YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉細(xì)菌學(xué)級(jí)粉末RT不sigma
Gallicacid3,4,5-三羥基苯酸25克BR
SUPERBROTH,POWDER超級(jí)肉湯, 粉末生物技術(shù)級(jí)RT不sigma
Fmoc-Thr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-*5克特純,98%
HMEDIUMBROTHH 培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級(jí)淺米黃色粉末RT不sigma
Fmoc-D-Ala-OHN-芴甲氧羰?;?D-*25克特純,98%
WESTERNMAX™ALKALINEPHOSPHATASECHROMOGENICDETECTIONKIT,MOUSE堿性嶙酸酶發(fā)光檢測(cè)試劑盒,小鼠生物技術(shù)級(jí)COLDsigma
Ferulicacid3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸5克AR,99%
HYDROXYPROPYLMETHYLCELLULOSE羥丙基甲基纖維素高純級(jí)白色粉末RTsigma
FastgreenFCF堅(jiān)牢綠FCF100克BR,98%
MONENSIN,SODIUMSALT莫能菌素,鈉鹽超純級(jí)白色至微黃色粉末FROZENsigma
henylglyc
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