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雜交管（35×100mm）1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟

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雜交管（35×100mm）1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

雜交管 (35×100mm)1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時(shí)候，需要使用本步驟，即通過(guò)體積排阻色譜或過(guò)濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購(gòu)）對(duì)于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個(gè)堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來(lái)純化長(zhǎng)度不小于 10 個(gè) 堿基的寡核苷酸。

雜交管 (35×100mm)1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長(zhǎng) 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無(wú)水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過(guò)第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時(shí)，乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時(shí)，請(qǐng)?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
雜交管 (35×100mm)1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹：

雜交管 (35×100mm)1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個(gè)微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無(wú)水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

琥珀酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Ammonium succinate，級(jí)別：PH=6.5，規(guī)格：50毫克
CHAPSOCHAPSO蛋白組學(xué)級(jí)1G82473-24-3RT
羊蠟酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Decanoic acid，級(jí)別：BR，75%，規(guī)格：250毫克
TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN*抑制劑,大豆蛋白組學(xué)級(jí)1G9035-81-8Frozen
三氯化金，英文名或英文縮寫(xiě)：Gold(III) chloride，級(jí)別：特純，97%，規(guī)格：1克
TBSWITHNONFATMILK,PWDBLENDTBS 含脫脂奶粉, 粉末包蛋白組學(xué)級(jí)5 PackRT
高鐵血紅素，英文名或英文縮寫(xiě)：Hematin，級(jí)別：AR，99.5%，規(guī)格：1公斤
NEXTGEL12.5%ACRYLAMIDESOLNPROTNEXT GEL 12.5%蛋白組學(xué)級(jí)100MLRT
原兒茶醛，英文名或英文縮寫(xiě)：3,4-Dihydroxybenzdehyde，級(jí)別：BR，90%，規(guī)格：500克
SSCBUFFERTAETSSSC 緩沖液,蛋白組學(xué)級(jí)100 TAETSRT
牛膽酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：Sodium taurocholate hydrate，級(jí)別：CP，規(guī)格：1公斤

雜交管 (35×100mm)1個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟NMY51 酵母感受態(tài)細(xì)胞   10×100μL   5,5- 二硫代雙 (2- 硝基苯甲酸 )
Y187 酵母感受態(tài)細(xì)胞   10×100μL   黃嘌呤
Y2HGold 酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞   10×100μL   尿酸
AD494(DE3) 菌種   1mL   人血清白蛋白 V
AG1 菌種   1mL   L- * ( 還原型 )
BJ5183 菌種   1mL   L- *
BL21 菌種   1mL   L- 鹽酸半*
BL21（AI）菌種   1mL   L- *
BL21-CodonPlus-RIL 菌種   1mL   植物凝膠
1mL