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即用型封堵液（Nylon ）50mL實(shí)驗(yàn)方法

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即用型封堵液（Nylon ）50mL實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

即用型封堵液 (Nylon )50mL實(shí)驗(yàn)方法磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時(shí)候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購(gòu)）對(duì)于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個(gè)堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長(zhǎng)度不小于 10 個(gè) 堿基的寡核苷酸。

即用型封堵液 (Nylon )50mL實(shí)驗(yàn)方法使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長(zhǎng) 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時(shí)，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時(shí)，請(qǐng)?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
即用型封堵液 (Nylon )50mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品介紹：

即用型封堵液 (Nylon )50mL實(shí)驗(yàn)方法磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個(gè)微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

pH變色域：10.0（黃）～12.0（紅）
乙醇溶解試驗(yàn)：合格
靈敏度試驗(yàn)：合格
水溶解試驗(yàn)：合格
〖灼燒殘?jiān)?以〖硫酸鹽〗計(jì))：18.0～24.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：棕黃色粉末。溶于水，其溶液呈棕黃色
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑，金屬著色劑。常用1%鈉鹽作指示劑
〖保存〗：RT
酸性茜素藍(lán)B
〖英文名稱〗：Acid alizarin blue B
〖其他名稱〗：媒染藍(lán)B；3-[(5-氯-2-羥基苯基)偶氮]-4,5-二羥基-2,7-萘二磺酸二鈉鹽；媒介藍(lán)13；鉻藍(lán)SE；酸性鉻深蘭；鉻蘭SE；酸性媒介溶藍(lán)；酸性鉻深藍(lán)；酸性媒介深藍(lán)
〖CAS號(hào)〗：1058-92-0
C16H9ClN2Na2O9S2=518.81
〖級(jí)別〗：BS
紅外光譜〖鑒別〗：合格
λmax：552～556nm(甲醇)
λmax：526.～530nm(甲醇)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：藍(lán)黑色至棕黑色帶金屬光澤粉狀或深藍(lán)色粉末。溶于水呈品紅色，溶于溶纖素，稍溶于乙醇。在濃硫酸中呈溶藍(lán)色，稀釋后呈品紅色、在濃硝酸中呈棕光紅色溶注估燒堿液中呈紅光藍(lán)色溶液。其水溶液，加濃鹽酸呈品紅色、加濃氫氧呈藍(lán)色。染色時(shí)遇銅、〖鐵〗，色光變化大。水中溶解度（80℃）50g/L
基苯偶氮)-7-(3-乙?；脚嫉?-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸

即用型封堵液 (Nylon )50mL實(shí)驗(yàn)方法錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂250g用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗(yàn)
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ) Oxford Agar Base 用于單增李氏菌的選擇性分離(SN標(biāo)準(zhǔn))
GAM肉湯 Anaerobic Broth 250克用于專性厭氧菌培養(yǎng)
發(fā)根農(nóng)桿菌培養(yǎng)基250g/瓶incubationmedia發(fā)根農(nóng)桿菌培養(yǎng)基250g/瓶
BrainHeartinfusionAgar
Mn2+NutrientAgar
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ) Buffered Listeria Enrichment Broth 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
乳糖-明膠培養(yǎng)基 Lactose-Gelatin Medium 250克產(chǎn)氣莢膜梭菌明膠液化試驗(yàn)
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基l用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色incubationmedia大腸桿菌顯色培養(yǎng)基l用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色
Pfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂) 250g 用于糞鏈球菌的選擇性分離和計(jì)數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))
卵黃瓊脂基礎(chǔ)250g加入卵黃，用于厭氧梭狀芽孢桿菌的分離培養(yǎng)
PALCAM瓊脂 PALCAM Agar 用于單增李氏菌選擇性分離(FDA標(biāo)準(zhǔn))
TSC瓊脂 TSC Agar 250克產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)
大腸菌顯色培養(yǎng)基l用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌大腸菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色incubationmedia大腸菌顯色培養(yǎng)基l用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌大腸菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色
PfizerEnterococcusSelectiveAgar
EggYolkAgarBase
Hal