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鯡魚精 DNA 溶液1mL實驗方法

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更新時間：2017-01-17 16:48:18瀏覽次數：538次

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產品簡介

鯡魚精 DNA 溶液1mL實驗方法運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細介紹

鯡魚精 DNA 溶液1mL實驗方法產品介紹：

鯡魚精 DNA 溶液1mL實驗方法使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質時，請在第
8 步之后進行。
磷酸化反應標記：
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應（前反應）：
1. 在微量離心管中制備下列反應液：

2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記：
當摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個堿基的寡核苷酸。

KF鏈球菌肉湯用于鏈球菌的選擇性增菌培養(yǎng)
支原體培養(yǎng)基基礎(含*) Mycoplasma Broth Base 用于培養(yǎng)支原體的基礎培養(yǎng)基
布氏肉湯 Brucella Broth 250克用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備
改良Giolitti-Cantobi肉湯250用于*的增菌培養(yǎng)incubationmedia改良Giolitti-Cantobi肉湯250用于*的增菌培養(yǎng)
HydrogenSulfideIndoleMotilityMedium
KFStreptococcusBroth
Kovacs氏靛基質試劑 10mLx1 incubation media Kovacs氏靛基質試劑 10mLx1
紅四氮唑沙保羅培養(yǎng)基 TTC-Sabourand,s Medium 250克用于分離真菌，酵母菌等
TMP瓊脂培養(yǎng)基250用于*的分離培養(yǎng)incubationmediaTMP瓊脂培養(yǎng)基250用于*的分離培養(yǎng)
乳糖肉湯 250g 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌
50%卵黃乳液5ml*加入HB0262
V-P甲、乙液試劑 10mLx2 incubation media V-P甲、乙液試劑 10mLx2
三苯四唑瓊脂基礎 TTC Agar Base 250克彎曲桿菌的TTC試驗
緩沖蛋白胨水(BPW)250用于沙門氏菌前增菌培養(yǎng)，亦可用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(GB、SN標準)incubationmedia緩沖蛋白胨水(BPW)250用于沙門氏菌前增菌培養(yǎng)，亦可用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(GB、SN標準)
LactoseBroth
50%eggyolkemulsion
1%亞碲酸鉀溶液 5mL/支x10 incubation media 1%亞碲酸鉀溶液 5mL/支x10
三苯四唑營養(yǎng)瓊脂 TCC Nutrient Agar 250克用于細菌總數測定時防止菌落蔓延
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)250用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)，需加入煌綠和碘液(GB、SN標準)incubationmedia四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)250用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)，需加入煌綠和碘液(GB、SN標準)
煌綠瓊脂 250g 用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)
氧化酶試劑細菌氧化酶試驗
亮綠瓊脂 250(g) incubation media 亮綠瓊脂 250(g)
三苯四唑*吐溫80營養(yǎng)瓊脂 TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250克用于化妝品中細菌總數測定
膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標準)incubationmedia膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標準)
BrilliantGreenAgar
Oxidasereagent
平板計數瓊脂(PCA) 250(g) incubation media 平板計數瓊脂(PCA) 250(g)
胰蛋白胨大豆*聚山梨酸酯瓊脂 TAT Broth 250克化妝品微生物檢測
三糖鐵瓊脂(TSI)250生化培養(yǎng)基，用于腸桿菌科細菌的生化反應篩選(GB、SN標準)incubationmedia三糖鐵瓊脂(TSI)250生化培養(yǎng)基，用于腸桿菌科細菌的生化反應篩選(GB、SN標準)
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂 250g 用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)
*吐溫80營養(yǎng)瓊脂250g用于化妝品細菌總數測定(GB標準)
平板計數瓊脂(PCA) 1000(g) incubation media 平板計數瓊脂(PCA) 1000(g)
*培養(yǎng)基 Glycine Medium 250克彎曲桿菌*耐受性試驗
SS瓊脂250用于沙門氏菌，志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)incubationmediaSS瓊脂250用于沙門氏菌，志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)
DesoxycholateCitrateAgar
LecithinTween80NutrientAgar
假單胞分離瓊脂 250(g) incubation media 假單胞分離瓊脂 250(g)
快速硫化氫試驗瓊脂 H2S Test Medium 250克彎曲桿菌的硫化氫試驗
亞利桑那菌瓊脂(SA)于亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標準)incubationmedia亞利桑那菌瓊脂(SA)于亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標準)
吲哚培養(yǎng)基(蛋白胨水) 10g 生化培養(yǎng)基，用于細菌靛基質試驗，亦稱*肉湯(SN標準)
乙酰胺瓊脂250g用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)
假單胞分離肉湯 250(g) incubation media 假單胞分離肉湯 250(g)
脫氧核糖核酸酶甲基綠瓊脂基礎 Dnase Agar Base With Methyl Green 100克用于細菌的DNA酶水解試驗
鎂孔雀綠肉湯(MM，RVMedium)250用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標準)incubationmedia鎂孔雀綠肉湯(MM，RVMedium)250用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標準)
IndoleMedium
AcetamideAgar
假單胞F瓊脂 250(g) incubation media 假單胞F瓊脂 250(g)
波爾頓肉湯 Bolton Selective Enrichment Broth 250克彎曲桿菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HE瓊脂(HE)250用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(FDA標準)incubationmediaHE瓊脂(HE)250用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(FDA標準)
EF-18瓊脂 250g 用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)
十六烷*基*瓊脂250g用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)
假單胞P瓊脂 250(g) incubation media 假單胞P瓊脂 250(g)
彎曲桿菌培養(yǎng)基基礎 CCDA Base 250克彎曲桿菌的分離培養(yǎng)
賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基5生化培養(yǎng)基，賴氨酸脫羧酶試驗(GB、SN標準)incubationmedia賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基5生化培養(yǎng)基，賴氨酸脫羧酶試驗(GB、SN標準)
EF-18Agar

紫脲酸銨
〖英文名稱〗：Murexide；Acid ammonium purpurate；Ammonium purpurate；5,5′-Nitrilodibarbituric acid ammonium salt
〖其他名稱〗：氨基紫色酸；紅紫酸銨；骨螺紫；紫尿酸胺；5，5′-次氮基二巴比土酸〖銨鹽〗；5-((六氫-2,4,6-三氧代-5-嘧啶基)亞氨基)-2,4,6(1H,3H,5H)嘧啶三酮單〖銨鹽〗
〖CAS號〗：3051-09-0
C8H8N6O6=284.19
〖級別〗：IND
絡合試驗：合格
〖灼燒殘渣〗：≤0.1%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅紫色結晶性粉末，帶有綠色金屬光澤。能與許多陽離子形成各種顏色的絡合物。溶于熱水，微溶于冷水，幾乎不溶于乙醇和乙迷。其水溶液呈深紫色，并隨〖PH值〗不同而不同，在堿性溶液中呈深藍色，在酸性溶液中為無色。水溶液極易變質?！既埸c〗＞300℃。zui大吸收波長(水中)520nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡合指示劑(用以滴定鈣、銅、鈷、〖鎳〗、錳、鈧、〖鋅〗等)。鈣的光度測定
〖保存〗：RT，避光
鄰甲*
〖英文名稱〗：o-Cresolphthalein；3,3′-Dimethylphenolphthalein；3,3-Bis(4-hydroxy-3methylphenyl)-1-(3H)-isobenzofuranone
〖其他名稱〗：鄰甲酚呋酞；2-甲*, 3,3′-二甲基*；3,3-雙(4-羥基-3-甲基苯基)-1(3H)-異苯并呋喃酮；鄰甲苯*；3,3'-二甲*；鄰甲酚酜酞
示劑。熒光指示