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酵母 tRNA 溶液 B（精提）1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟

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酵母 tRNA 溶液 B（精提）1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹：

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長(zhǎng) 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無(wú)水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過(guò)第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時(shí)，乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時(shí)，請(qǐng)?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個(gè)微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無(wú)水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時(shí)候，需要使用本步驟，即通過(guò)體積排阻色譜或過(guò)濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購(gòu)）對(duì)于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個(gè)堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來(lái)純化長(zhǎng)度不小于 10 個(gè) 堿基的寡核苷酸。

Sabouraud’sGlucosechloramphenicolAgar
赫氏培養(yǎng)基 250(g) incubation media 赫氏培養(yǎng)基 250(g)
鈉結(jié)晶紫增菌液 Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth 250克副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)
EF-250用于濾膜法檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌(SN/TcubationmediaEF-250用于濾膜法檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌(SN/T1)
XLT4Agar
7.5%鈉肉湯250g用于*的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
赫氏增菌液 250(g) incubation media 赫氏增菌液 250(g)
鈉蔗糖瓊脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 250克副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
新生霉素/支*5使用前，每支加入HB4incubationmedia新生霉素/支*5使用前，每支加入HB4153中
D/E中和肉湯 250g 用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物培養(yǎng)
7.5%SodiumChlorideBroth
溶血瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 溶血瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
嗜鹽菌選擇性瓊脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 250克副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
RVS肉湯250用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaRVS肉湯250用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))
D/ENeutralizingBroth
亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中
龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
3.5%鈉三糖鐵瓊脂 3.5% NaC1 TSI Agar 250克副溶血弧菌生化試驗(yàn)鑒別
MKTTn肉湯250用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaMKTTn肉湯250用于食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))
D/E中和瓊脂 250g 用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)
Letheen肉湯250g用于化妝品中微生物檢測(cè)
菌種培養(yǎng)基 250(g) incubation media 菌種培養(yǎng)基 250(g)
鈉血瓊脂基礎(chǔ) Sodium Chloride Blood Agar Base 250克副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn)
賴(lài)氨酸鐵瓊脂(LIA)250用于食品中沙門(mén)氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia賴(lài)氨酸鐵瓊脂(LIA)250用于食品中沙門(mén)氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
D/ENeutralizingAgar
LetheenBroth
四環(huán)素檢定瓊脂 250(g) incubation media 四環(huán)素檢定瓊脂 250(g)
霍亂雙糖鐵瓊脂 Kligler Iron Agar 250克用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng)
改良MSRV培養(yǎng)基250用于沙門(mén)氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)incubationmedia改良MSRV培養(yǎng)基250用于沙門(mén)氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)
M-肉湯 250g 用于干燥食品和種子中沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)
Letheen瓊脂250g用于化妝品中微生物檢測(cè)
MR-VP培養(yǎng)基 250(g) incubation media MR-VP培養(yǎng)基 250(g)
T1N1瓊脂 T1N1 Agar 250克霍亂弧菌的培養(yǎng)
SCCRAM肉湯250濾膜法食品中沙門(mén)氏菌前增菌(SN/TcubationmediaSCCRAM肉湯250濾膜法食品中沙門(mén)氏菌前增菌(SN/T1)
M-Broth
LetheenAgar
察氏培養(yǎng)基 250(g) incubation media 察氏培養(yǎng)基 250(g)
T1N0肉湯 T1N0 Broth 250克霍亂弧菌的培養(yǎng)
BPL瓊脂250用于食品中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)incubationmediaBPL瓊脂250用于食品中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)
煌綠黃胺瓊脂 250g 用于沙門(mén)氏的分離培養(yǎng)
改良HC瓊脂添加劑每支添加于HB8597中
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA 250(g) incubation media 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA 250(g)
T1N3肉湯 T1N3 Broth 250克霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)
改良BPLS瓊脂250用于各種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia改良BPLS瓊脂250用于各種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
BrilliantGreenAgarw/Sulfadiazine

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟C31H30N2Na2O13S=716.62
〖級(jí)別〗：IND
λ max：433～437nm
靈敏度試驗(yàn)：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅棕色結(jié)晶性粉末,易吸濕。易溶于水，不溶于無(wú)水乙醇。水溶液為紅色，酸性溶液中為檸檬黃色，金屬絡(luò)合物為鮮紅色，堿性溶液中為紅紫色。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡(luò)合指示劑，滴定〖鋅〗、鉍、鎘、鈷、銅、〖鐵〗、汞、銦、鑭系元素、〖鎳〗、〖鉛〗、鈧、釷、鋯、駝、鈾(VI)、釩等。光度測(cè)定〖鋅〗、鋁、鈹、鉍、鑭、鈮、〖鎳〗、鈀、釷、釔、鋯等。酸堿指示劑
〖保存〗：RT，避光
二甲酚橙四鈉
于其它〖用途〗。