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SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟

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更新時間：2017-01-17 16:42:43瀏覽次數(shù)：225次

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產(chǎn)品簡介

SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時，請在第
8 步之后進(jìn)行。
SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟產(chǎn)品介紹：

SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個堿基的寡核苷酸。

葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基250g用于藥品，生物制品無菌試驗
DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ) 100(g) incubation media DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ) 100(g)
改良McBride瓊脂培養(yǎng)基 Modified Mcbride Agar Base 250克單增李氏菌選擇性分離
T湯250用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaT湯250用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))
GN增菌液 9ml*20支/包主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)
DextrosePeptoneMedium
*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP) 250(g) incubation media *卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP) 250(g)
Fraser培養(yǎng)基 Fraser Medium 250克李氏菌的增菌培養(yǎng)
T湯250用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaT湯250用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))
亞西酸鹽*增菌液SC 10ml*20支/包用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
真菌瓊脂培養(yǎng)基250g用于無菌生長試驗
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ) 250(g) incubation media 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ) 250(g)
改良緩沖蛋白胨水 MBPW 250克李氏菌的增殖
*葡萄糖斜面瓊脂于霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia*葡萄糖斜面瓊脂于霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于志賀氏菌顯色培養(yǎng)
FungiAgarMedium
改良V-P培養(yǎng)基 250(g) incubation media 改良V-P培養(yǎng)基 250(g)
檸檬酸鹽培養(yǎng)基 Citrate Agar 250克大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的鑒別
mCPC培養(yǎng)基250用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))incubationmediamCPC培養(yǎng)基250用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
改良MSRV培養(yǎng)基(定量) 250g 用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)
磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基250g用于甲基紅試驗
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)(TSSB) 250(g) incubation media 胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)(TSSB) 250(g)
尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) Urease Agar Base 250克細(xì)菌脲酶檢測，腸桿菌鑒別
mCPC培養(yǎng)基添加劑每瓶添加于mCPC培養(yǎng)基中incubationmediamCPC培養(yǎng)基添加劑每瓶添加于mCPC培養(yǎng)基中
ModifiedSemi-SolidRappaportVassiliadsAgar
PhosphateGlucosePeptoneWaterMedium
酪蛋白瓊脂 250(g) incubation media 酪蛋白瓊脂 250(g)
KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ) Potassium Cyanide Medium Base 100克用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗
副溶血性弧菌瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)incubationmedia副溶血性弧菌瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
柯氏尿素瓊脂 250g 用于細(xì)菌脲酶檢測
胰蛋白胨水培養(yǎng)基250g用于靛基質(zhì)試驗
產(chǎn)芽孢肉湯 250(g) incubation media 產(chǎn)芽孢肉湯 250(g)
MR-VP試驗用培養(yǎng)基 MR VP Broth 250克腸桿菌科細(xì)菌的甲基紅和VP試驗
副溶血性弧菌增菌液250用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)incubationmedia副溶血性弧菌增菌液250用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)
MLCB寒天培地 250g 用于沙門氏菌分離培養(yǎng)

SSPE 溶液 ,20×100mL實驗步驟〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計)：≤20.0%
水溶解試驗：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：棕黑色粉末，能溶于熱水，冷卻后成紅棕色溶液，稍溶于醇，并呈棕光品紅色；微溶于丙同。遇過量鹽酸生成棕紫色沉淀；在濃硝酸中呈枯桔黃色；遇氫氧呈深藍(lán)色，后變紅色，溶于濃硫酸成藍(lán)黑色溶液，稀釋后生成棕色沉淀。水中溶解度（90℃）為25g/L。染色時遇銅、〖鐵〗時色光影響較大。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定水硬度用指示劑，金屬絡(luò)合指示劑，測定鈣、鎂、鋇、姻、錳、〖鉛〗、鈧、鍶、〖鋅〗和鋯
〖保存〗：RT
鉻藍(lán)黑R
〖英文名稱〗：Eriochrome blue black R；Mordant Black 17；Acid chrome blue black；Palatine chrome black 6BN；Calcon；Chrome blue black R；Anthracene blue black；Solochrome dark blue
〖其他名稱〗：依來鉻藍(lán)黑R；酸性媒介黑R；酸性鉻藍(lán)黑R；酸性媒介藍(lán)黑；茜素藍(lán)黑；鉻蘭黑R；鈣試劑；媒介黑17；3-羥基-4-(2-羥基-1-萘偶氮)-1-萘磺酸鈉；宮殿黑染料；鈣紫紅素
〖CAS號〗：2538-85-4
C20H13N2NaO5S=416.39
〖級別〗：IND