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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司


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超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟

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更新時(shí)間:2017-01-17 16:36:39瀏覽次數(shù):392次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟磷酸化反應(yīng)(前反應(yīng)):
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液:


2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記:
當(dāng)摻入水平很低的時(shí)候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對(duì)于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個(gè)堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個(gè) 堿基的寡核苷酸。

超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟使用方法: 
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補(bǔ)足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:

超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟磷酸化反應(yīng)標(biāo)記:
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個(gè)微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

CzapekDoxAgar
DFI瓊脂(阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基) 1000mL/瓶 incubation media DFI瓊脂(阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基) 1000mL/瓶
MFC培養(yǎng)基 MFC Medium 250克 飲用水中大腸菌濾膜法檢驗(yàn)
CCDA添加劑2ml*支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中incubationmediaCCDA添加劑2ml*支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中
嗜鹽菌選擇性瓊脂 250g 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
產(chǎn)毒培養(yǎng)基250g用于青霉,曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)
DFI瓊脂(阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基) 200g/瓶 incubation media DFI瓊脂(阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基) 200g/瓶
亮綠乳糖培養(yǎng)基 Brilliant Green Lactose Medium 250克 飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗(yàn)
Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)250用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法)incubationmediaCampy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)250用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法)
HalophilicBacteriaSelectiveAgar
Toxin-ProducingMedium
PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) incubation media PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
*吐溫80營養(yǎng)瓊脂 Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250克 化妝品檢驗(yàn)中細(xì)菌計(jì)數(shù)
Campy-Cefex添加劑2ml*添加于200mlCampy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)中incubationmediaCampy-Cefex添加劑2ml*添加于200mlCampy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)中
鈉血瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
高鹽察氏瓊脂250g用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250(g) incubation media 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250(g)
乙酰胺瓊脂 Acetamide Agar 250克 綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)
蠟樣芽孢桿菌incubationmedia蠟樣芽孢桿菌
SodiumChlorideBloodAgarBase
SaltCzapekDoxAgar
LIM培養(yǎng)基 250(g) incubation media LIM培養(yǎng)基 250(g)
SCDLP液體培養(yǎng)基 SCDLP Broth Medium 250克 化妝品檢驗(yàn)中樣品制備、增菌
*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP)250用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)(GB.SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP)250用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)(GB.SN標(biāo)準(zhǔn))
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250g 用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
玉米粉瓊脂250g用于真菌培養(yǎng)
酵母葡萄糖*瓊脂(YDC) 250(g) incubation media 酵母葡萄糖*瓊脂(YDC) 250(g)
假單胞菌屬選擇瓊脂 Cetrimide Agar 250克 用于綠膿桿菌的分離培養(yǎng)
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)250用于蠟樣芽孢桿菌的MPN值測(cè)定(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)250用于蠟樣芽孢桿菌的MPN值測(cè)定(SN標(biāo)準(zhǔn))
KIA
CornMeatMedium
CVT瓊脂培養(yǎng)基 250(g) incubation media CVT瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(PH8.0-8.2) Common Nutrient Agar 250克 一般細(xì)菌的培養(yǎng),分離培養(yǎng)霍亂弧菌,埋迪霉菌鑒定用
改良V-P培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia改良V-P培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
T1N1瓊脂 250g 用于霍亂弧菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅培養(yǎng)基)250g用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定
麥康凱肌醇阿東醇羧芐*瓊脂基礎(chǔ)(MIAC) 100(g) incubation media 麥康凱肌醇阿東醇羧芐*瓊脂基礎(chǔ)(MIAC) 100(g)
PDP瓊脂 King Medium A 250克 綠膿菌色素測(cè)定
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)250用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)250用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
T1N1Agar
RoseBengalMedium
腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊鈉瓊脂) 250(g) incubation media 腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊鈉瓊脂) 250(g)
*發(fā)酵培養(yǎng)基 Mannitol Ferment Medium 250克 腸道桿菌的鑒別,細(xì)菌*發(fā)酵試驗(yàn)
酪蛋白瓊脂250用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia酪蛋白瓊脂250用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
T1N0肉湯 250g 用于霍亂弧菌的生長試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))

超級(jí)雜交液 (Oligo 探針 )10mL實(shí)驗(yàn)步驟水溶解試驗(yàn):合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.05% 
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:無色或白色結(jié)晶粉末。對(duì)光敏感。溶于水和乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)亞〖鐵〗的光度測(cè)定。銀、銅、〖鋅〗、鎘等離子的掩蔽劑。鈀、錳等離子的沉淀劑。指示劑
〖保存〗:RT,避光
玫瑰紅三羧酸銨
〖英文名稱〗:Aluminon;Aurintricarboxylic acid triammonium salt;C.I. 43810
〖其他名稱


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