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超級雜交液 B（含甲酰胺）100mL實(shí)驗(yàn)方法

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更新時間：2017-01-17 16:35:47瀏覽次數(shù)：242次

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產(chǎn)品簡介

超級雜交液 B（含甲酰胺）100mL實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

超級雜交液 B（含甲酰胺）100mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品介紹：

超級雜交液 B（含甲酰胺）100mL實(shí)驗(yàn)方法使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時，請在第
8 步之后進(jìn)行。
磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個堿基的寡核苷酸。

酵母粉葡萄糖*瓊脂(YDC)250g用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測定(ISO標(biāo)準(zhǔn))
腸球菌肉湯 250(g) incubation media 腸球菌肉湯 250(g)
普通肉湯瓊脂平板 Nutrient Agar Plate 50塊一般細(xì)菌的培養(yǎng)和細(xì)菌總數(shù)的測定
酚紅葡萄糖肉湯250用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia酚紅葡萄糖肉湯250用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
TIN0Broth
YeastExtractDextroseChloramphenicolAgar
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g) incubation media 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g)
M-H瓊脂平板 M-H Agar Plate 10塊
木糖-明膠培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗(yàn)incubationmedia木糖-明膠培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗(yàn)
T1N3肉湯 250g 用于霍亂弧菌的生長試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
Candida250g用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測定
膽汁七葉苷瓊脂(BEA) 100(g) incubation media 膽汁七葉苷瓊脂(BEA) 100(g)
沙保弱氏瓊脂平板沙保弱氏瓊脂平板 10塊
臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ)250用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養(yǎng)incubationmedia臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ)250用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養(yǎng)
T1N3Broth
CandidaElectiveAgar
濾膜腸球菌瓊脂 250(g) incubation media 濾膜腸球菌瓊脂 250(g)
克氏鐵瓊脂斜面平板 KIA Plate 10支
葡萄糖酪胨瓊脂250用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計數(shù)(APHA方法)incubationmedia葡萄糖酪胨瓊脂250用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計數(shù)(APHA方法)
*葡萄糖斜面瓊脂(AGS) 100 用于霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
DTM培養(yǎng)基250g用于食品中真菌的培養(yǎng)
CATC瓊脂 250(g) incubation media CATC瓊脂 250(g)
弧菌選擇瓊脂平板 TCBS Agar Plate 10塊
D-環(huán)*0.2加入250mlTSC瓊脂基礎(chǔ)中incubationmediaD-環(huán)*0.2加入250mlTSC瓊脂基礎(chǔ)中
ArginineDextroseAgar
DTMMedium
D/E中和瓊脂 250(g) incubation media D/E中和瓊脂 250(g)
* Blood Agar Plate 50塊營養(yǎng)需求較高的細(xì)菌培養(yǎng)
產(chǎn)芽孢肉湯250用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)incubationmedia產(chǎn)芽孢肉湯250用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)
mCPC培養(yǎng)基 250g 用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
DRBC瓊脂250g用于食品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)
D/E中和肉湯 250(g) incubation media D/E中和肉湯 250(g)
SS瓊脂平板 SS Agar Plate 10塊沙門菌屬和志賀菌屬細(xì)菌的分離培養(yǎng)
*/支*5用水溶解后添加于HB0256中incubationmedia*/支*5用水溶解后添加于HB0256中
mCPCMedium
DRBCAgar
AC肉湯 250(g) incubation media AC肉湯 250(g)
伊紅美蘭瓊脂平板 EMB Agar Plate 10塊腸道革蘭氏陰性菌的分離培養(yǎng)
多價蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基250用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia多價蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基250用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
mCPC培養(yǎng)基添加劑 1ml*5 每瓶添加于100ml mCPC培養(yǎng)基中

C22H23N3O9=473.44
〖級別〗：AR
靈敏度試驗(yàn)：合格
溶解試驗(yàn)：合格
〖灼燒殘渣〗：≤0.2%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃棕色或棕紅色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,幾乎不溶于乙迷、丙同和氯方?！既埸c(diǎn)〗220～225℃(分解)。zui大吸收波長 522(450)nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定水、食物及組織中的鋁。光度測定鋁、鈹和氟化物、鎵、鈧。用于鋁的紙色譜
〖保存〗：RT，避光
玫瑰紅6G
〖英文名稱〗：Rhodamine 6G；Basic Red 1；Rhodamine 590；Rhodamine 6GX；6GDN；Rhodyle 4G；Brilliant pink 5G；Calcozine red 6G extra；C.I. 45160
〖其他名稱〗：羅丹明6G；羅丹明590；蕊香紅6G；若丹明6G；黃光堿性蕊香紅；堿性紅1；9-[2-(乙氧羰基)苯基]-3,6-二(乙氨基)-2,7-二甲基氯化占噸翁；染料索引45160
〖CAS號〗：989-38-8
C28H31ClN2O3=479.02
〖級別〗：BS
R