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填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次圖片

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填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次圖片運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次圖片磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時(shí)候，需要使用本步驟，即通過(guò)體積排阻色譜或過(guò)濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購(gòu)）對(duì)于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個(gè)堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來(lái)純化長(zhǎng)度不小于 10 個(gè) 堿基的寡核苷酸。

填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次圖片使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長(zhǎng) 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無(wú)水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過(guò)第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時(shí)，乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時(shí)，請(qǐng)?jiān)诘?br />8 步之后進(jìn)行。
產(chǎn)品介紹：

磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個(gè)微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無(wú)水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

YeastExtractGlucoseOxytetracyclineAgar
半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250(g) incubation media 半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250(g)
1% NaC1乳糖發(fā)酵管 1% NaC1乳糖發(fā)酵管 20支 BR
明膠培養(yǎng)基基礎(chǔ)250生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)菌明膠液化試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia明膠培養(yǎng)基基礎(chǔ)250生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)菌明膠液化試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Preston肉湯基礎(chǔ) 250g 用于空腸彎曲桿菌的選擇性增菌
馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂250g用于椰毒假單胞酵米面亞種的產(chǎn)毒培養(yǎng)
RVS肉湯 250(g) incubation media RVS肉湯 250(g)
3% NaC1乳糖發(fā)酵管 3% NaC1乳糖發(fā)酵管 20支 BR
綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基(PDP)250用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基(PDP)250用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
PrestonBrothBase
PotatoDextroseSemisolidAgar
MKTTn肉湯基礎(chǔ) 250(g) incubation media MKTTn肉湯基礎(chǔ) 250(g)
3.5% NaC1乳糖發(fā)酵管 3.5% NaC1乳糖發(fā)酵管 20支 BR
乳糖膽鹽培養(yǎng)基250用于化妝品中糞大腸菌的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia乳糖膽鹽培養(yǎng)基250用于化妝品中糞大腸菌的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCD) 250g 用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
沙氏葡萄糖瓊脂(USP)250g用于真菌的分離培養(yǎng)
M肉湯 250(g) incubation media M肉湯 250(g)
5%乳糖發(fā)酵管 5%乳糖發(fā)酵管 20支 BR
TTC*-吐溫80-營(yíng)養(yǎng)瓊脂250用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaTTC*-吐溫80-營(yíng)養(yǎng)瓊脂250用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))
CCDABase
SabouraudDextroseAgarMedium
煌綠肉湯增菌液基礎(chǔ) 250(g) incubation media 煌綠肉湯增菌液基礎(chǔ) 250(g)
1% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 1% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 20支 BR
HC瓊脂基礎(chǔ)250用于化妝品中霉菌總數(shù)測(cè)定(Acumedia方法)incubationmediaHC瓊脂基礎(chǔ)250用于化妝品中霉菌總數(shù)測(cè)定(Acumedia方法)
Bolton肉湯 250g 用于空腸彎曲菌的增菌(GB標(biāo)準(zhǔn))
酪蛋白葡萄糖瓊脂250g用于霉菌、酵母菌等的分離培養(yǎng)
Rustigian氏尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) incubation media Rustigian氏尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
3% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 3% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 20支 BR
改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)250用于化妝品中微生物檢測(cè)(Acumedia方法)incubationmedia改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)250用于化妝品中微生物檢測(cè)(Acumedia方法)
BoltomBroth
SabouraudDextroseAgar
克氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 250(g) incubation media 克氏枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 250(g)
3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管 20支 BR
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)250用于混濁制品需氧菌無(wú)菌試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)250用于混濁制品需氧菌無(wú)菌試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Mueller-Hinton瓊脂(MHA) 250g 用于彎曲桿菌的藥物敏感性試驗(yàn)
沙氏葡萄糖瓊脂(含*)250g用于霉菌和酵母菌的分離培養(yǎng)
MIO培養(yǎng)基 100(g) incubation media MIO培養(yǎng)基 100(g)
1% NaC1蔗糖發(fā)酵管 1% NaC1蔗糖發(fā)酵管 20支 BR
YPD瓊脂250用于測(cè)定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaYPD瓊脂250用于測(cè)定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Mueller-HintonAgar
Sabouraud-glucoseAgarwithChloramphenicol
煌綠磺胺瓊脂(BGS瓊脂) 250(g) incubation media 煌綠磺胺瓊脂(BGS瓊脂) 250(g)
3% NaC1蔗糖發(fā)酵管 3% NaC1蔗糖發(fā)酵管 20支 BR
抗生素檢定培養(yǎng)基H)250用于*，，*，等效價(jià)測(cè)定incubationmedia抗生素檢定培養(yǎng)基H)250用于*，，*，等效價(jià)測(cè)定
茚三酮溶液 5ml*2 用于空腸彎曲菌的檢測(cè)。

C20H6I4Na2O5=879.88
〖級(jí)別〗：IND
〖含量〗（干品計(jì)）：≥80.0%
靈敏度試驗(yàn)：合格
水溶解試驗(yàn)：合格
〖干燥失重〗：≤8.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：棕色粉末。溶于水溶液呈櫻紅色，溶于乙醇。加鹽酸于水液中析出黃棕色沉淀，加氫氧生成紅色沉淀，但能溶于過(guò)量試劑中。zui大吸收波長(zhǎng)(水中)524nm、(95％乙醇中) 531nm。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)沉淀滴定的吸附指示劑。酸堿滴定熒光指示劑，pH大于2.5無(wú)熒光，pH不小于4.0呈淺綠色熒光。光度測(cè)定試劑。生物染色劑
〖保存〗：RT，避光
隱色結(jié)晶紫
〖英文名稱(chēng)〗：LCV；Leucocrystal Violet； 4,4',4''-Methylidynetris(N,N-dimethylaniline)；Leuco Crystal Violet
〖其他名稱(chēng)〗：隱性結(jié)晶紫；無(wú)色結(jié)晶紫；退色結(jié)晶紫；三(對(duì)二甲氨基苯基)甲烷
稱(chēng)〗：Leuco