PCR 法 DNA 探針*標記試劑盒 5次實驗方法磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記：
當摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應(yīng)的標記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。

PCR 法 DNA 探針*標記試劑盒 5次實驗方法使用方法: 
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液： 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時，請在第
8 步之后進行。
產(chǎn)品介紹：

磷酸化反應(yīng)標記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液： 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。

胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)于藥品線無菌灌裝試驗
普通肉湯培養(yǎng)基 250(g) incubation media 普通肉湯培養(yǎng)基 250(g)
賴氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管 賴氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管 20支 BR
AC肉湯250用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗(AlphaBiosciences方法)incubationmediaAC肉湯250用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗(AlphaBiosciences方法)
改良Skirrow瓊脂添加劑 1ml*5支 每支添加于100ml HB0242中
TryptoseSoyaBroth
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) incubation media 亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 20支 BR
改良馬丁液體培養(yǎng)基250用于菌苗及生物制品霉菌無菌檢驗incubationmedia改良馬丁液體培養(yǎng)基250用于菌苗及生物制品霉菌無菌檢驗
ModifiedSkirrowAgarAdditives
20藥典增補培養(yǎng)基
葡萄球菌增菌肉湯 250(g) incubation media 葡萄球菌增菌肉湯 250(g)
3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 20支 BR
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基250用于生物制品霉菌無菌檢驗incubationmedia改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基250用于生物制品霉菌無菌檢驗
FBP溶液 1ml*5支 每支添加于100ml HB0242中
胰酪胨大豆肉湯(TSB)250g用于藥品或生物制品中總需氧菌計數(shù)
葡萄球菌選擇性瓊脂 250(g) incubation media 葡萄球菌選擇性瓊脂 250(g)
*肉湯發(fā)酵管 *肉湯發(fā)酵管 20支 BR
營養(yǎng)瓊脂(NA)250細菌總數(shù)測定，細菌傳代培養(yǎng)incubationmedia營養(yǎng)瓊脂(NA)250細菌總數(shù)測定，細菌傳代培養(yǎng)
FBPSolution
TryptoseSoyaBroth
甲苯胺藍-DNA瓊脂 100(g) incubation media 甲苯胺藍-DNA瓊脂 100(g)
MR-VP發(fā)酵管 MR-VP發(fā)酵管 20支 BR
四號瓊脂基礎(chǔ)250用于霍亂弧菌的選擇性分離，后加亞碲酸鉀incubationmedia四號瓊脂基礎(chǔ)250用于霍亂弧菌的選擇性分離，后加亞碲酸鉀
氧化酶試紙片 10片 用于空腸彎曲菌氧化酶試驗

胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)于藥品線無菌灌裝試驗
普通肉湯培養(yǎng)基 250(g) incubation media 普通肉湯培養(yǎng)基 250(g)
賴氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管 賴氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管 20支 BR
AC肉湯250用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗(AlphaBiosciences方法)incubationmediaAC肉湯250用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗(AlphaBiosciences方法)
改良Skirrow瓊脂添加劑 1ml*5支 每支添加于100ml HB0242中
TryptoseSoyaBroth
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) incubation media 亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 20支 BR
改良馬丁液體培養(yǎng)基250用于菌苗及生物制品霉菌無菌檢驗incubationmedia改良馬丁液體培養(yǎng)基250用于菌苗及生物制品霉菌無菌檢驗
ModifiedSkirrowAgarAdditives
20藥典增補培養(yǎng)基
葡萄球菌增菌肉湯 250(g) incubation media 葡萄球菌增菌肉湯 250(g)
3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 20支 BR
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基250用于生物制品霉菌無菌檢驗incubationmedia改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基250用于生物制品霉菌無菌檢驗
FBP溶液 1ml*5支 每支添加于100ml HB0242中
胰酪胨大豆肉湯(TSB)250g用于藥品或生物制品中總需氧菌計數(shù)
葡萄球菌選擇性瓊脂 250(g) incubation media 葡萄球菌選擇性瓊脂 250(g)
*肉湯發(fā)酵管 *肉湯發(fā)酵管 20支 BR
營養(yǎng)瓊脂(NA)250細菌總數(shù)測定，細菌傳代培養(yǎng)incubationmedia營養(yǎng)瓊脂(NA)250細菌總數(shù)測定，細菌傳代培養(yǎng)
FBPSolution
TryptoseSoyaBroth
甲苯胺藍-DNA瓊脂 100(g) incubation media 甲苯胺藍-DNA瓊脂 100(g)
MR-VP發(fā)酵管 MR-VP發(fā)酵管 20支 BR
四號瓊脂基礎(chǔ)250用于霍亂弧菌的選擇性分離，后加亞碲酸鉀incubationmedia四號瓊脂基礎(chǔ)250用于霍亂弧菌的選擇性分離，后加亞碲酸鉀
氧化酶試紙片 10片 用于空腸彎曲菌氧化酶試驗

紅外光譜〖鑒別〗：和對照品匹配
紫外光譜UV spectrometry：符合
〖干燥失重〗：≤10 % (135℃)
吸光度Absorbance min.：0.350(2.5mg/L, 0.02mol/L 醋酸銨溶液，625～630nm)(以干基計)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：具有金屬光澤的紅紫色或暗紫色粉末。易溶于水，水溶液呈藍色。可溶于甘油，乙醇及丙二醇。耐光性，耐熱性，耐酸性，耐堿性均好，對檸檬酸，酒石酸穩(wěn)定?！既埸c〗：283℃
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑。
〖保存〗：RT，避光
鈣鎂試劑
〖英文名稱〗：Calmagite；1-(1-Hydroxy-4-methyl-2-phenylazo)-2-naphthol-4-sulfonic acid；3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-5-methylphenylazo)naphthalene-1-sulfonic acid
〖其他名稱〗：3-羥基-4-[(2-羥基-5-甲基苯基)偶氮]-1-萘磺酸；1-(1-羥基-4-甲基-2-苯偶氮)-2-萘酚-4-磺酸；鈣鎂指示劑
〖CAS號〗：3147-14-6 
C17H14N2O5S紅外光譜〖鑒別〗：和對照品匹配
紫外光譜UV spectrometry：符合
〖干燥失重〗：≤10 % (135℃)
吸光度Absorbance min.：0.350(2.5mg/L, 0.02mol/L 醋酸銨溶液，625～630nm)(以干基計)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：具有金屬光澤的紅紫色或暗紫色粉末。易溶于水，水溶液呈藍色?？扇苡诟视?，乙醇及丙二醇。耐光性，耐熱性，耐酸性，耐堿性均好，對檸檬酸，酒石酸穩(wěn)定。〖熔點〗：283℃
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑。
〖保存〗：RT，避光
鈣鎂試劑
〖英文名稱〗：Calmagite；1-(1-Hydroxy-4-methyl-2-phenylazo)-2-naphthol-4-sulfonic acid；3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-5-methylphenylazo)naphthalene-1-sulfonic acid
〖其他名稱〗：3-羥基-4-[(2-羥基-5-甲基苯基)偶氮]-1-萘磺酸；1-(1-羥基-4-甲基-2-苯偶氮)-2-萘酚-4-磺酸；鈣鎂指示劑
〖CAS號〗：3147-14-6 
C17H14N2O5S紅外光譜〖鑒別〗：和對照品匹配
紫外光譜UV spectrometry：符合
〖干燥失重〗：≤10 % (135℃)
吸光度Absorbance min.：0.350(2.5mg/L, 0.02mol/L 醋酸銨溶液，625～630nm)(以干基計)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：具有金屬光澤的紅紫色或暗紫色粉末。易溶于水，水溶液呈藍色?？扇苡诟视停掖技氨?。耐光性，耐熱性，耐酸性，耐堿性均好，對檸檬酸，酒石酸穩(wěn)定?！既埸c〗：283℃
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑。
〖保存〗：RT，避光
鈣鎂試劑
〖英文名稱〗：Calmagite；1-(1-Hydroxy-4-methyl-2-phenylazo)-2-naphthol-4-sulfonic acid；3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-5-methylphenylazo)naphthalene-1-sulfonic acid
〖其他名稱〗：3-羥基-4-[(2-羥基-5-甲基苯基)偶氮]-1-萘磺酸；1-(1-羥基-4-甲基-2-苯偶氮)-2-萘酚-4-磺酸；鈣鎂指示劑
〖CAS號〗：3147-14-6 
C17H14N2O5S紅外光譜〖鑒別〗：和對照品匹配
紫外光譜UV spectrometry：符合
〖干燥失重〗：≤10 % (135℃)
吸光度Absorbance min.：0.350(2.5mg/L, 0.02mol/L 醋酸銨溶液，625～630nm)(以干基計)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：具有金屬光澤的紅紫色或暗紫色粉末。易溶于水，水溶液呈藍色?？扇苡诟视?，乙醇及丙二醇。耐光性，耐熱性，耐酸性，耐堿性均好，對檸檬酸，酒石酸穩(wěn)定?！既埸c〗：283℃
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑。
〖保存〗：RT，避光
鈣鎂試劑
〖英文名稱〗：Calmagite；1-(1-Hydroxy-4-methyl-2-phenylazo)-2-naphthol-4-sulfonic acid；3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-5-methylphenylazo)naphthalene-1-sulfonic acid
〖其他名稱〗：3-羥基-4-[(2-羥基-5-甲基苯基)偶氮]-1-萘磺酸；1-(1-羥基-4-甲基-2-苯偶氮)-2-萘酚-4-磺酸；鈣鎂指示劑
〖CAS號〗：3147-14-6 
C17H14N2O5S