資源名稱  百脈根中慢生根瘤菌*

種屬  Mesorhizobium loti

提供形式  斜面培養(yǎng)物

安全等級(jí)  1

模式菌株  no

應(yīng)用領(lǐng)域  與百脈根共生固氮

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  0063

生長(zhǎng)條件  28-30℃

存儲(chǔ)條件  真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

詳細(xì)說明

描述  1、個(gè)體形態(tài)特征：桿狀，運(yùn)動(dòng)，有鞭毛，有夾膜，革蘭氏陰性，內(nèi)含PHB，裂殖

操作流程：
菌株復(fù)蘇：（按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇）
1) 所有菌株，顯色培養(yǎng)基分4區(qū)，每區(qū)一株，標(biāo)明菌株號(hào)、菌種名常用縮寫如下：
cal: 白念珠菌 cgl：光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌，其他菌種標(biāo)記全名。
2) 隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外，另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h
菌種鑒定：（48h后觀察結(jié)果）。
保藏方法
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
保存方法： 
1.簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月。
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