干細(xì)胞驟進行操作：
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白，例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等，可以參考相關(guān)文獻提取這些亞細(xì)胞組份蛋白，也可以使用試劑盒進行抽提。
收集完蛋白樣品后，為確保每個蛋白樣品的上樣量一致，需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同，需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因為不同的蛋白濃度測定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
（1）、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻資料進行配制，也可以使用博研生物的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
（2）、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積，在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻資料配制，也可以使用我公司的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘，以充分變性蛋白。
（3）、上樣與電泳
冷卻到室溫后，把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果，以及判斷蛋白分子量大小，使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。
電泳時通常*在上層膠時使用低電壓恒壓電泳，而在溴酚藍(lán)進入下層膠時使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類似電泳裝置，低電壓可以設(shè)置在80-100V，高電壓可以設(shè)置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見，也可以采用整個SDS-PAGE過程恒壓的方式，通常把電壓設(shè)置在100V，然后設(shè)定定時時間為90－120分鐘。設(shè)置定時可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過頭。
通常電泳時溴酚藍(lán)到達膠的底端處附近即可停止電泳，或者可以根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的電泳情況，預(yù)計目的蛋白已經(jīng)被適當(dāng)分離后即可停止電泳。
干細(xì)胞HPAF cDNA 人肺動脈成纖維細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPAEpiC cDNA 人肺泡上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBEpiC cDNA 人支氣管上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HTEpiC cDNA 人氣管上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HSAEpiC cDNA 人小氣道上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPF cDNA 人肺成纖維細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBSMC cDNA 人支氣管平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HTSMC cDNA 人氣管平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HSkMC cDNA 人骨骼肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HSkMSC cDNA 人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞cDNA 20 reactions
HSkMM cDNA 人骨骼肌成肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HRGEC cDNA 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HRPTEpiC cDNA 人腎近曲小管上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HRCEpiC cDNA 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HREpiC cDNA 人腎上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HRMC cDNA 人腎系膜細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBdSMC cDNA 人膀胱平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HUC cDNA 人尿道上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBdSF cDNA 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPEpiC cDNA 人前列腺上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPrF cDNA 人前列腺成纖維細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPSMC cDNA 人前列腺平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HCO cDNA 人顱骨造骨細(xì)胞cDNA 20 reactions干細(xì)胞
