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干細(xì)胞雙抗體夾心法

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干細(xì)胞雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀(guān)察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
干細(xì)胞HPEpiC miRNA    人前列腺上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HPrF miRNA    人前列腺成纖維細(xì)胞微小RNA    1 µg
HPSMC miRNA    人前列腺平滑肌細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCO miRNA    人顱骨造骨細(xì)胞微小RNA    1 µg
HS miRNA    人滑膜細(xì)胞微小RNA    1 µg
HNPC miRNA    人髓核細(xì)胞微小RNA    1 µg
HHSEC miRNA    人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HIBEpiC miRNA    人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HH miRNA    人肝細(xì)胞微小RNA    1 µg
HHSteC miRNA    人肝星形細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCMEC miRNA    人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HAEC miRNA    人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HASMC miRNA    人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCM miRNA    人心肌細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCM-a miRNA    人心肌細(xì)胞-成人微小RNA    1 µg
HCF miRNA    人心肝成纖維細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCF-av miRNA    人心臟成纖維細(xì)胞-成人心室微小RNA    1 µg
HCF-aa miRNA    人心肌成纖維細(xì)胞-成人心房微小RNA    1 µg
HCEpiC miRNA    人角膜上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HK miRNA    人角膜細(xì)胞微小RNA    1 µg
HRPEpiC miRNA    人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HLEpiC miRNA    人晶狀體上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HIPEpiC miRNA    人虹膜色素上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HConF miRNA    人結(jié)膜成纖維細(xì)胞微小RNA    1 µg
HNPCEpiC miRNA    人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HTMC miRNA    人小梁網(wǎng)細(xì)胞微小RNA    1 µg
HAmEpiC miRNA    人羊膜上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HVT miRNA    人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞微小RNA    1 µg
HVMF miRNA    人絨毛間葉成纖維細(xì)胞微小RNA    1 µg
HPA-v miRNA    人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟微小RNA    1 µg
HPA-s miRNA    人前脂肪細(xì)胞-皮下微小RNA    1 µg
HMSC-bm miRNA    人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓微小RNA    1 µg
HMSC-ad miRNA    人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪微小RNA    1 µg
HMSC-hp miRNA    人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟微小RNA    1 µg
HUMSC miRNA    人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞微小RNA    1 µg
HPMSC miRNA    人肺間充質(zhì)干細(xì)胞微小RNA    1 µg
HUVEC miRNA    人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HUAEC miRNA    人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HUVSMC miRNA    人臍靜脈平滑肌細(xì)胞微小RNA    1 µg
HUASMC miRNA    人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞微小RNA    1 µg干細(xì)胞

 


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