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小鼠脂磷壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒使用說明書

閱讀:136發(fā)布時間:2017-01-11

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小鼠脂磷壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為240 pg/ml,160 pg/ml,80 pg/ml,40 pg/ml,20 pg/ml)。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
小鼠脂磷壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒操測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
高載量 PCR 片段純化試劑盒    50 次    *
革氏陽性細(xì)菌質(zhì)粒 DNAout    50 次    硝苯吡啶
庚烷磺酸鈉    1g    茚三酮
工具酶緩沖液    1mL    對硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷
* A     50 支    鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷
* B     50 支    對硝基苯磷酸二鈉鹽
供體馬血清    100mL    P- 硝基苯基磷酸*
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3    100 次    濕潤劑 P-40
古細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 1    100 次    新生霉素
*脫氫酶    3000U    *
*測試盒    48 T    章魚堿
* S 轉(zhuǎn)移酶    1mg    n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
*過氧化物酶檢測試劑盒    100 次    油紅 O
*還原酶檢測試劑盒    100 次     鄰苯二胺
*瓊脂糖    2mL    橙黃G鈉
*一還原酶測試盒    50 T    苔素
骨骼肌細(xì)胞生長因子    5mL    L- *鹽酸鹽
小鼠脂磷壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒


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