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雜交瘤細胞；1C培養(yǎng)

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更新時間：2017-02-08 09:03:10瀏覽次數(shù)：144次

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產(chǎn)品簡介

雜交瘤細胞；1C培養(yǎng)細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 雜交瘤細胞；1C培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限未定

產(chǎn)品名稱	雜交瘤細胞；1C培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
鹽膚木Rhus chinensis   Rhuscholide A   鹽膚木內酯 A   944804-58-4   C31H42O3   ≥95%
鉤藤 Uncaria rhynchopylla (Miq.) Jacks.   Rhynchophylline   鉤藤堿   76-66-4   C22H28N2O4   ≥98%
割舌樹Walsura robusta   Richenoic acid   none   134476-74-7   C30H48O3   ≥95%
狹翅獨活Heracleum stenopterum   Rivulobirin B   9-羥基-4-[(4-甲氧基-7-氧代-7H-呋喃并[3,2-g][1]苯并吡喃-9-基)氧基]-7H-呋喃并[3,2-g][1]苯并吡喃-7-酮   194145-29-4   C23H12O9   ≥97.5%
白亮獨活Heracleum candicans   Rivulobirin E      237407-59-9   C32H30O11   ≥95%
三七pseudo-ginseng   R-Notoginsenoside R2   R-三七皂苷R2      C41H69O13   ≥98%
國槐Sophora japonica   Robinetin   洋槐黃素   490-31-3   C15H10O7   ≥96%
國槐Sophora japonica   Robinin   刺槐素   301-19-9   C33H40O19   ≥98%
望江南Cassia occidentalis   Robtein   2',3,4,4',5-五羥基查耳酮   2679-65-4   C15H12O6   ≥95%
決明Cassia tora   Robtin   刺槐雙氫黃酮   4382-34-7   C15H12O6   ≥97%小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgM)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Helicobacter pylori antibody(IgM)ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgG)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Helicobacter pylori antibody(IgG)ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Idian Hedgehog,IHH ELISA kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠吲哚銨2,3-雙加氧酶1(IDO1)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1 ELISA kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse sonic hedgehog N-Terminus,Shh-N ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T