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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-02-06 11:01:07瀏覽次數(shù):110次
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小鼠雜交瘤細(xì)胞;3G4復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;3G4復(fù)蘇 | 半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;3G4復(fù)蘇
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
TGM3 *轉(zhuǎn)胺酶3抗體
RNF92 環(huán)指蛋白92抗體
CD90 / Thy1 CD90抗體
*MT 線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體
Tomosyn/STXBP5 突觸融合蛋白結(jié)合蛋白5抗體
UNC80 UNC80蛋白抗體
TSPAN4 四分子交聯(lián)體4抗體(四旋蛋白)
TBX18 轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體
TROVE-2 干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體
TRIP4 甲狀腺激素受體相互作用蛋白4抗體
TXLNB β-taxilin蛋白抗體
TFDP2 轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體角葉鞘柄木Toricellia angulata Cleomiscosin C 臭矢菜素C 84575-10-0 C21H20O9 ≥95%
角葉鞘柄木Toricellia angulata (R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol (R,E)-癸烯-4,6-二炔-1,8-二醇 931116-24-4 C10H12O2 ≤80%
角葉鞘柄木Toricellia angulata (S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol (S,E)-癸-2,9-二烯-4,6-二炔-1,8-二醇 931114-98-6 C10H10O2 ≥90%
角葉鞘柄木Toricellia angulata 1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol 1,6-二噁螺[4.5]-2-癸醇 83015-88-7 C9H16O3 ≥98%
角葉鞘柄木Toricellia angulata 3,10-Dihydroxydielmentha-5,11-diene-4,9-dione 3,10-二羥基-5,11-二薄荷二烯-4,9-二酮 106623-23-8 C20H28O4 ≥95%
角葉鞘柄木Toricellia angulata Griselinoside 71035-06-8 C18H24O12 ≥95%
角葉鞘柄木Toricellia angulata Sinapaldehyde TRANS-3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂醛 4206-58-0 C11H12O4 ≥98%
角葉鞘柄木Toricellia angulata Sinapaldehyde glucoside 芥子醛配糖物 154461-65-1 C17H22O9 ≥98%
姜 Zingiber Officinale rose 8-Gingerol 8-姜酚 23513-08-8 C19H30O4 ≥98%
姜 Zingiber officinale Rosc 6-Shogaol 6-姜烯酚 555-66-8 C17H24O3 ≥98%
姜 Zingiber officinale Rosc Zingerone 姜酮 122-48-5 C11H14O3 ≥98%
劍葉龍血樹Dracaenacoch inch inensis (Lour.) Cochinchinenin C 龍血素 C 956103-79-0 C33H34O7 ≥98%
劍葉龍血樹 Dracaenacoch inch inensis Loureirin B 龍血素 B 119425-90-0 C18H20O5 ≥98%
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