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小鼠骨髓纖維原細(xì)胞;M2-10B4特性

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所  在  地上海

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更新時(shí)間:2017-02-04 13:47:52瀏覽次數(shù):227次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠骨髓纖維原細(xì)胞;M2-10B4特性,質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

詳細(xì)介紹

小鼠骨髓纖維原細(xì)胞;M2-10B4特性來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

細(xì)胞名稱  小鼠骨髓纖維原細(xì)胞;M2-10B4特性
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞是CJ Eaves從(C57BL/6JX C3H/HeJ)F1小鼠的骨髓基質(zhì)中分離建立的。M2-10B4表達(dá)層粘連蛋白和膠原蛋白IV,但并不表達(dá)膠原蛋白I。在*培養(yǎng)體系中該細(xì)胞支持人或鼠的骨髓組織生成。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C7
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  陰性
STR   STR鑒定
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

產(chǎn)品名稱生長(zhǎng)特性發(fā)貨地貨期
貼壁生長(zhǎng)上海3-5天

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
OIF    骨誘導(dǎo)因子抗體
6-Oct    八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體
OLIG2    少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2抗體
Os05g0477200 protein    水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體
OSTM1    骨硬化病相關(guān)跨膜蛋白1抗體
Orosomucoid 2    類粘蛋白2抗體
4-Oct    胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體
OPG    骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體
2-Oct    陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
osteopontin    骨橋蛋白/分泌型磷蛋白1抗體
osteopontin    骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)
Orexin-A    增食欲素A/欲激素A
Osterix    成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體
Ovalbumin    雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體梓Catalpa ovata    α-Lapachone    α-拉杷醌    4707-33-9    C15H14O3    ≥98%
豬膽汁Pig Ga11 B1adder    Hyodeoxycholic acid    *    83-49-8    C24H40O4    ≥98%
珠子參Panacis Majoris Rhizoma    Chikusetsu saponin Ⅳa    竹節(jié)參皂苷IVa    51415-02-2    C42H66O14    ≥98%
重樓Paris yunnanensis Franch.    Polyphyllin E    重樓皂苷E    76296-73-6    C51H82O20    ≥98%
重樓Paris yunnanensis Franch.    Polyphyllin II    重樓皂苷II    76296-72-5    C44H70O16    ≥98%
重樓Paris yunnanensis Franch.    Polyphyllin VII    重樓皂苷Ⅶ    76296-75-8    C51H84O22    ≥98%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis    4-O-Methylhelichrysetin    2',4'-二羥基-4,6'-二甲氧基查爾酮    56121-44-9    C17H16O5    ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis    7-O-Methylporiol    5,4'-二羥基-6-甲基-7-甲氧基黃烷酮    206560-99-8    C17H16O5    ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis    16-Nor-15-oxodehydroabietic acid    16-去甲-15-氧代脫氫松香酸    200813-31-6    C19H24O3    ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis    13-Oxopodocarp-8(14)-en-18-oic acid    none    63976-69-2    C17H24O3    ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis    Piperitol    薄荷醇    52151-92-5    C20H20O6    ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis    Syzalterin    6,8-二甲基芹菜甙元    94451-48-6    C17H14O5    ≥95%

 

 


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