【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠正常肝細胞；NCTC 1469使用說明書
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞源自新生小鼠肝臟組織，由VJ Evans分離并建立于1952年。檢測結果顯示該細胞小鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
重樓Paris yunnanensis Franch. Polyphyllin III 重樓皂苷III 19057-60-4 C45H72O16 ≥98%
重樓 Paris yunnanensis Franch. Polyphyllin Ⅰ 重樓皂苷I 50773-41-6 C44H70O16 ≥98%
重樓 Paris yunnanensis Franch. Polyphyllin VI 重樓皂苷Ⅵ 55916-51-3 C39H62O13 ≥98%
重齒毛當歸 Angelicae pubescens Columbianadin 二氫歐山芹醇當歸酸酯 5058-13-9 C19H20O5 ≥98%
中華大蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Bufalin 蟾毒靈 465-21-4 C24H34O4 ≥98%
中華大蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor Bufotalin 蟾蜍他靈 471-95-4 C26H36O6 ≥98%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis Angophorol 2,3-二氫-5-羥基-2-(4-羥基苯基)-7-甲氧基-6,8-二甲基-4H-1-苯并吡喃-4-酮 133442-54-3 C18H18O5 ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis 8-Demethylsideroxylin 5-羥基-2-(4-羥基苯基)-7-甲氧基-6-甲基-4H-1-苯并吡喃-4-酮 80621-54-1 C17H14O5 ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis Epinortrachelogenin none 125072-69-7 C20H22O7 ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis 3'-Methyl-4-O-methylhelichrysetin none 109471-13-8 C18H18O5 ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis 3'-Methylflavokawin (2E)-1-(2-羥基-4,6-二甲氧基-3-甲基苯基)-3-(4-羥基苯基)-2-丙烯-1-酮 1044743-35-2 C18H18O5 ≥95%OSGIN1 氧化應激誘導生長抑制因子1抗體
Otoraplin 纖維細胞源蛋白
OTC *氨基甲酰轉移酶抗體
OS9 OS-9蛋白抗體
Cenexin1 尾部結構蛋白抗體
phospho-ODF2(Ser796) 磷酸化尾部結構蛋白抗體
OGG1 8-羥基*DNA糖基化酶
OR10J3 嗅覺受體家族10亞基J3抗體
OR2A4 嗅覺受體家族2亞基4抗體
OR5P3 嗅覺受體家族5亞基3抗體
ODF3B 外致密纖維蛋白3B抗體
Osteocalcin 骨鈣蛋白/骨鈣素抗體
ODZ3 固生蛋白3抗體
CT135 腫瘤/抗原135抗體
