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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-02-04 13:06:36瀏覽次數(shù):212次
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小鼠雜交瘤細(xì)胞;FKHR復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!
小鼠雜交瘤細(xì)胞;FKHR復(fù)蘇來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;FKHR復(fù)蘇 | 半貼壁生長(zhǎng) | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交,細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Netrin 4 軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體
Phospho-NMDAR2B (Tyr1252) 磷酸化*受體2B抗體
NOX2 NADPH氧化酶2抗體
NOXA2 NADPH氧化酶活化蛋白1抗體
phospho-NFKB p65(Ser529) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體
phospho-NFKB p65(Thr435) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體
phospho-NFKB p65(Thr254) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體
phospho-NFKB p65(Thr505) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體
NET1 神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體
Nectin 3 細(xì)胞粘附分子3抗體(脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白3)
NHLH2 螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體
Nodal 胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Nodal抗體鴨嘴花Adhatoda vasica Vasicine 駱駝蓬堿,鴨嘴花堿 6159-55-3 C11H12N2O ≥98.5%
鴨嘴花Adhatoda vasica Vasicinol 鴨嘴花酚堿,鴨嘴花粉堿 5081-51-6 C11H12N2O2 ≥99%
駱駝蓬Peganum harmala Vasicinone 鴨嘴花堿酮 486-64-6 C11H10N2O2 ≥99%
雞骨常山Alstonia yunnanensis Vellosimine 維洛斯明鹼 6874-98-2 C19H20N2O ≥95%
牙香樹(shù)Aquilaria sinensis Velutin 氈毛美洲茶素 25739-41-7 C17H14O6 ≥98.5%
蘿芙木Rauvolfia verticillata Venoterpine (6S,7R)-6,7-二氫-7-甲基-5H-環(huán)戊并[C]吡啶-6-醇 17948-42-4 C9H11NO ≥95%
藜蘆Veratrum nigrum Linn. Veratraldehyde 藜蘆醛 120-14-9 C9H10O3 ≥98%
肉蓯蓉 Cistanche deserticola Y.C.Ma Verbascoside 毛蕊花糖苷 22323-52-0 C29H36O15 ≥98%
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata Verbenacine none 717901-03-6 C20H30O3 ≥95%
馬鞭草Herba Verbenae Verbenalin 馬鞭草苷 548-37-8 C17H24O10 ≥98%
白背楓Buddleja asiatica Verminoside 梓醇 6-*酯 50932-19-9 C24H28O13 ≥98%
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