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小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克?。籐-929 L929復(fù)蘇

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小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??；L-929 L929復(fù)蘇

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更新時間：2017-01-24 14:41:15瀏覽次數(shù)：154次

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產(chǎn)品簡介

小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??；L-929 [L929]復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克?。籐-929 [L929]復(fù)蘇
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性   親本L的亞克隆，是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)物之一，L細(xì)胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下網(wǎng)眼狀空隙和脂肪組織。APRT+，HPRT+。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  馬血清，10%
傳代方法   1：2-1：8
傳代情況 PN
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類

產(chǎn)品名稱	小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆；L-929 [L929]復(fù)蘇
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆；L-929 [L929]復(fù)蘇復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??；L-929 [L929]復(fù)蘇操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
G gamma4   G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體
GPBB   腦糖原磷酸化酶抗體
GABR B3   G氨基丁酸受體3抗體
GABA A Receptor alpha 3   G氨基丁酸受體α3抗體
GEN1   GEN1蛋白抗體
Glutamine PRPP amidotransferase   *磷酸核糖基焦磷酸酰胺基轉(zhuǎn)移酶
Galactosidase alpha   α-半乳糖苷酶抗體
GPR55   蛋白偶聯(lián)受體55抗體
GADD45 gamma   生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ
GAS2L3   生長停滯特異蛋白2家族3抗體
Granzyme K   顆粒酶K抗體
GDPD5   甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體
GGT1   γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶抗體
GABA A Receptor alpha 1   G1氨基丁酸A型受體α1抗體
GAD65   *脫羧酶-65抗體
GAD65   *脫羧酶-65抗體(C端）布氏桿菌種子培養(yǎng)基   250g   用于布氏桿菌菌種復(fù)活、傳代
克氏瓊脂   250g   用于銅綠假單胞菌的克氏試驗(yàn)
Kligler's Agar
鐵瓊脂   250g   用于產(chǎn)硫化氫細(xì)菌計數(shù)
*瓊脂培養(yǎng)基   250g   用于紡織品微真菌影響評價試驗(yàn)
Complete Agar Medium
L型細(xì)菌高滲鹽*   250g   用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)
L-Bacterial Hypertonic Salt Broth
葡萄糖酸鹽   20支   綠膿桿菌用
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克?。籐-929 [L929]復(fù)蘇*雙水解酶（綠膿桿菌）   20支   綠膿桿菌用
麥康凱肌醇阿東醇羧卞*瓊脂（MZAC）   250g   用于食品中克雷伯氏菌分離培養(yǎng)
MZAC Agar
肉膏酵母葡萄糖瓊脂   250g   用于厭氧菌培養(yǎng)
含0.2%可溶性淀粉的BCP脫脂奶粉平板計數(shù)培養(yǎng)基   250g   用于食品中嗜熱菌芽孢計數(shù)（SN標(biāo)準(zhǔn)）