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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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小鼠抗人IgG雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgG-502培養(yǎng)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海

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更新時(shí)間：2017-01-24 11:10:57瀏覽次數(shù)：232次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠抗人IgG雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgG-502培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱  小鼠抗人IgG雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgG-502培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性    
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

產(chǎn)品名稱小鼠抗人IgG雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgG-502培養(yǎng)
貨期3－5天
發(fā)貨地上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Ficolin 2    彈蛋白結(jié)合蛋白Fcn2抗體
Factor I light chain    補(bǔ)體因子I輕鏈抗體
FAHD1    FAHD1蛋白抗體
phospho-FAK(Ser910)    磷酸化粘著斑激酶抗體
Phospho-FAK(Tyr576)    磷酸化粘著斑激酶抗體
FAKD3    下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體
FAM134B    FAM134B蛋白抗體
phospho-FANCA (Ser1149)    磷酸化范可尼貧血組蛋白A抗體
FANCC    范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體
FXYD6    FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子6抗體
FYB    Fyn結(jié)合蛋白抗體
FYCO1    鋅指蛋白FYCO1抗體
FYTTD1    FYTTD1蛋白抗體Off fiber sheep blood        
Power - nitrate medium        
梭菌鑒別瓊脂（DCA）    250g    用于干燥食品亞硫酸鹽還原梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)
Differentia Clostridial Agar        
強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）    250g    用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)（MERCK方法）
Differentia Reinforced Clostridial Agar        
強(qiáng)化梭菌瓊脂    250g    用于梭菌的分離培養(yǎng)
Reinforced Clostridium Agar        
CDC Anaerobic Agar        
亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子液體培養(yǎng)基    250g    用于亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子的增菌培養(yǎng)。
Sulfite Reducing Anaerobes Spore Liquid Medium        
皰肉培養(yǎng)基（液體）（試管）    1支    用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))。
Cooked Meat Medium Base        
*鈉溶液（12mg）    1ml*5    每支添加于100mlSPS中

 

 

 


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