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上海撫生實業(yè)有限公司
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海
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更新時間:2017-01-23 11:58:52瀏覽次數(shù):210次
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人骨肉瘤細胞;SF-86特性,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
人骨肉瘤細胞;SF-86特性 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人骨肉瘤細胞;SF-86特性
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
phospho-CDKN2A (Ser140) 磷酸化抑癌基因p16抗體
phospho-CDKN2A (Ser152) 磷酸化抑癌基因p16抗體
phospho-CDKN2A (Ser8) 磷酸化抑癌基因p16抗體
phospho-CREB-1(Ser129) 磷酸化CREB-1抗體
phospho-CSF2RB (Tyr766) 磷酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體
phospho-CDH2 (Tyr820) 磷酸化N-鈣粘附分子抗體
phospho-CDC27 (Thr244) 磷酸化后期促進復合蛋白3抗體
phospho-c-Abl(Tyr283) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體
phospho-c-Abl(Thr735) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體
C9orf75 9號染色體開放閱讀框75抗體
CD4 CD4抗體
CD42b 血小板糖蛋白GPIb抗體醋酸鉛培養(yǎng)基 250 用于硫化氫試驗
SIM培養(yǎng)基 250 用于硫化氫、動力、吲哚試驗
乳糖肉湯 250 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌
EF-18 瓊脂 250 用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)
新生霉素 1.5mg/支*5 使用前,每支加入100mlHB4153中
RVS 肉湯 250 用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)
MKTTn 肉湯 250 用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)
賴氨酸鐵瓊脂(LIA) 250 用于食品中沙門氏菌生化試驗(FDA標準)
改良MSRV培養(yǎng)基 250 用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)
SCCRAM肉湯 250 濾膜法食品中沙門氏菌前增菌(SN/T1059.1)
BPL瓊脂 250 用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)
改良BPLS瓊脂 250 用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)
MIO培養(yǎng)基 250 用于動力、吲哚和*試驗(FDA方法)
XLT4瓊脂 250 用于食品中致病菌,特別是沙門氏菌分離培養(yǎng)(Merck方法)
D/E中和肉湯 250 用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)
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